X-gal显色反应的基本原理是:当X-gal被β-galactosidase分解时,它会产生一种蓝色的产物,从而可以检测出β-galactosidase的活性。 X-gal显色反应的基本原理是,X-gal是一种β-D-galactosidase的专用抑制剂,它能够抑制酶的活性,阻止糖苷酶分解β-D-galactosidase,当酶被抑制时,X-gal就会变成蓝色的沉淀物。当细胞中...
原理:M13克隆体系包括M13克隆载体和M13特殊的寄主菌株两部分组成。β-半乳糖苷(LacZ)当它为四聚体时具有活性,可把无色的X-gal切割成半乳糖和深蓝色靛蓝,因此Xgal可作为β-半乳糖苷酶活性的一种指示剂。依据基因内互补作用的原理,利用基因工程的方法,即将编码同样的蛋白质多肽链序列,但各自具突变的序列,当这种载...
X-gal 显色反应的基本原理是使载体上与受体互补的α肽失活。搜索 题目 X-gal 显色反应的基本原理是使载体上与受体互补的α肽失活。 答案 解析收藏 反馈 分享
它具有显色化合物的作用。它是一种吲哚基碳水化合物、β-D-半乳糖苷、有机氯化合物、有机溴化合物和 D-醛己糖衍生物。图1.X-Gal化学结构 X-Gal基础信息 中文名:显色 β-半乳糖苷酶底物;5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷;Y5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷 英文名:X-Gal, chromogenic beta-...
2.细菌蓝白斑筛选原理 IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)为安慰型诱导物,可诱导β-半乳糖苷酶的产生,X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物,在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖和深蓝色的物质:5-溴-4-靛蓝,有色物质可使所在的菌落...
X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。基于这个特点,当pUC系列载体DNA以lacZ 缺欠细胞作为宿主进行转化时,或M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在培养基中加入X-Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。
生物活性:X-GAL 是一种广泛使用的显色 β-半乳糖苷酶底物。 β-半乳糖苷酶裂解 X-gal 并产生可检测到的不溶性蓝色化合物。 体外:将细胞 (以 HUVEC 为例) 在培养皿中培养至 80% 的合度时,在培养基中加入 50 μmol/L H2O2,培养 12 h。 随后用胰蛋白酶/EDTA 收获细胞,用 PBS 洗涤 3 次,再用 4...
X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈蓝色。基于这个特点,pUC系列载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出...