1.首先将X-Gal制成20 mg / ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（在-20°C下黑暗保存），然后将200μl的上述溶液和100μl的上述溶液添加到100 ml琼脂培养基IPTG中（24 mg / ml）和100μlAmp（100 mg / ml）制成X-Gal，IPTG，Amp平板培养基，将DNA片段插入pUC系列载体（或其他带有lacZ和Amp基因的载体）中，然...
首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的琼脂培养基中,加入200μl的上述溶液、100μl的IPTG(24 mg/ml)和100μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后,涂...
一般是配好的amp+LB板，涂板的时候把x-gal 40ul（20mg/ml）,IPTG 4ul（200mg/ml）加入到菌液里，然后混匀涂板。也可以先涂到板上在涂菌。配培养基的时候，一般不直接加x-gal，IPTG，确实存在浪费问题，因为菌只在平板表面长。
1.倒平板:LB固体培养基微波炉加热融化后或高压灭菌后冷却至55℃以下,每100ml培养基中加入 200ul 20mg/ml的 X-gal 溶液,40ul 100mg/ml的IPTGl 溶液和相应的抗生素溶液混匀倒平板即可。 2.也可直接将X-gal和IPTG溶液涂布在LB平板表面:例如,直径90mm 的平板(约20ml培养基)可以直接加入 40ul 20mg/ml的 X-...
将转化细菌或酵母涂于平板上,于 37 ℃或 30 ℃培养直至蓝色菌斑出现. 方法二 直接加入培养基: 1. 将已灭菌固体培养基冷却至 50-55 ℃; 2. 20 mg/mL X-α-Gal 母液,在 100 mL 固体培养基中加入 100-200 μL 混匀,快速倒平板.在培养基中 X-α-Gal 的终浓度是 20-40 μg/mL. 携带 MEL1 ...
● 配制方法: 50mg/ml IPTG 5ml:取250mg IPTG,溶于5ml无菌水中,过滤除菌后-20℃贮存。 20mg/ml X-Gal 5ml:取100mg X-gal,溶于5ml 二甲基甲酰胺(DMF),棕色瓶中-20℃贮存。此试剂无需灭菌。 ● 实验程序: 1 转化平板的制备: 向铺好的含有相应抗生素的固体琼脂平板表面加入16 μl的IPTG(50 mg/ml)、...
首先把IPTG配制成24mg/ml(100mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。然后在100ml的琼脂培养基中,加入100μl的上述溶液、200μl的X-Gal(20mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100μl的Amp(100mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ...
2.也可直接将X-α-gal溶液涂布在酵母筛选平板表面:例如,直径90mm 的平板(约20ml培养基)可以直接加入 40ul 20mg/ml的 X-α-gal 溶液,用无菌涂布棒涂布均匀,超净台晾干即可。 20 mg/ml X-a-Gal 溶液配制 0.1g X-α-Gal 加入二甲基甲酰胺(DMF)5ml,完全溶解后用0.22um的滤膜过滤除菌。