一种基于WST‑8检测NAD+浓度的酶循环方法,其特征在于:首先将样品进行酸化、中和、离心处理得到NAD+提取液,再进行酶循环反应;所述酶循环反应为乙醇在乙醇脱氢酶(ADH)的作用下氧化生成乙醛,同时NAD+被还原为NADH,生成的NADH在电子耦合试剂1‑mPMS的作用下将WST‑8还原生成橙黄色的甲臜,它在450nm左右有最大吸收...
2. 试剂盒的准备工作：a. G6P标准溶液的制备：把10mM的G6P标准品用G6P提取液稀释成适当的浓度梯度。如初次检测可以设置、31.25、62.5、125、250、500μM这几个浓度，检测时96孔板每孔加入50μl的标准品，相当于每孔加入的G6P的量为、1.56、3.125、6.25、12.5、25nmol。如有必要，在后续的实验中可以...
光度法: 可以使用G6P特异性酶(如葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,G6PDH)和相关试剂,在酶催化下测定G6P的浓度变化。这种方法基于酶催化反应产生的信号变化来间接测定G6P的含量。 质谱法(MS): 质谱技术也可用于测定G6P的浓度,通过质谱仪对这种分子进行检测和定量分析。 名称:G6P检测试剂盒(WST-8 纯度:95%+ 保存时间:1...
2.SOD活性测定步骤: (1)制备反应液:将WST-8溶液与辣根过氧化物酶(HRP)溶液按一定比例混合,得到WST-8/HRP工作液。 (2)制备样品:将待测的SOD样品进行适当的稀释,使其浓度在测定范围内。 (3)反应体系组装:将适量的WST-8/HRP工作液、稀释后的SOD样品和超氧化物发生剂(例如黄嘌呤核苷酸)按一定比例混合,得到反...
一种基于WST8检测NAD+浓度的酶循环方法,其特征在于:首先将样品进行酸化,中和,离心处理得到NAD+提取液,再进行酶循环反应;所述酶循环反应为乙醇在乙醇脱氢酶(ADH)的作用... 白玉杰,张晓娟,孙海星,... 被引量: 0发表: 2021年 一种基于WST-8检测NAD+浓度的酶循环方法 一种基于WST8检测NAD+浓度的酶循环方法,...
超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(WST-8法)测定意义: SOD(EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2 和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2 主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。
图1.NAD+/NADH检测试剂盒(WST-8法) (S0175)的工作原理图。 本试剂盒适用于检测细胞、组织以及其它适当样品中的NAD+和NADH各自的量、比值和总量。 本试剂盒提供的NAD+/NADH提取液有一定的通用性。使用本试剂盒中的NAD+/NADH提取液提取获得的细胞或组织样品,也可以用于碧云天生产的NADP+/NADPH检测试剂盒(WST-8...
WST-8/酶工作液(μl)160160032008000 反应启动工作液的配制:把试剂盒中的反应启动液(40X)融解后混匀,按照每1μL反应启动液(40X)加入39μL SOD检测缓冲液的比例进行稀释,混匀后即为反应启动工作液。根据待检测样品(包括标准品)的数量,配制适量的反应启动工作液。配制好的反应启动工作液4℃或冰浴保存,可以在当...
图2.碧云天乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(WST-8法) (C0019)对乳酸脱氢酶标准品的检测效果图。各浓度的LDH标准品加入LDH检测工作液后,37ºC孵育30分钟,测定A450,在0.15-50mU/ml范围内有良好的线性关系。实际检测数据会因检测仪器、实验条件等的不同而存在差异,本图仅供参考。 本试剂盒可检测细胞培养液、细胞裂解液...