WST-8法是一种常用的方法，用于测量超氧化物歧化酶（SOD）活性的一种光度法。实验步骤如下：1.准备工作：准备不同浓度的SOD标准溶液作为活性参照物。准备工作涉及制备反应缓冲液、WST-8试剂、xanthine氧化酶、xanthine和其他必要的试剂。2.实验操作：将样品（可能是细胞提取物、组织提取物或其他含有SOD的样品）与...
(4)使用合适的分光光度计进行吸光度测定,注意校准和操作的准确性。 通过WST-8法测定SOD活性,可以评估生物体内抗氧化能力的强弱,为研究氧化应激相关疾病的发生机制提供重要的实验数据。该方法简便、灵敏,适用于多种生物样品的测定,是目前常用的SOD活性测定方法之一。
SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 测定原理: 通过huangpl及huangpl氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-.),O2-.可与WST-8反应产生水溶性染料甲臜,后者在450nm处有吸收;SOD可清除O2-.,从而抑制了甲臜的形成;反应液黄色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。 组...
谷氨酸是一种氨基酸,通常用于神经传递和蛋白质合成。要测定谷氨酸的浓度,通常需要使用适当的化学方法或生化实验技术,比如高效液相色谱法(HPLC)或酶联免疫吸附试验(ELISA)等。这些方法可以通过对样品中谷氨酸的特定化学性质或免疫学特征的检测来定量测定其浓度。 WST-8法基于一种氧化还原反应,WST-8试剂在存在一些代谢酶的...
(3)WST-8染液:4℃保存。 (4)阳性对照:十二烷基硫酸钠(SDS)(200 μg/ml,100%细胞致死率浓度)。 2)细胞样本的处理: (1)细胞接种:选择贴壁细胞,包括中国仓鼠卵巢细胞CHO,人肺癌细胞A549和人肺正常上皮细胞BEAS-2B细胞。由于不同细胞系的增殖速率不同,需根据实验所用细胞种类对细胞接种密度进行优化。然后向96...
建议正式实验选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: ① 组织样本:取约0.1g组织(水分充足的样本可取0.25g),加入1mL提取液,在4ºC 或冰浴进行匀浆(或用各类常见匀浆器)。 4ºC×12000rpm离心10min,取上清作为待测液。
纯纯干货的CCK8+数据计算!CCK-8实验是基于WST-8在电子耦合试剂存在的情况下,被细胞线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞增殖成正比,与细胞毒性成反比,对同样的细胞,颜色的深浅和 - 慢病毒超牛专家曲博士®于2024110
实验一:细胞增殖分析 1、制备细胞悬液:细胞计数 2、接种到96孔板中:根据合适的铺板细胞数,每孔约100ul细胞悬液,同样的样本可做3个重复。 3、37℃培养箱中培养:细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时,如果不需要贴壁,这步可以省去。 4、加入10ul CCK8:由于每孔加入CCK8量比较少,有可能因试剂沾在孔壁上而带来...
WST-8比WST-1更加稳定，灵敏度更高，溶解性更强，更易于保存，在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下能够被细胞内脱氢酶还原成水溶性的甲臜染料，生成的甲臜量与活细胞数量成正比，在检测细胞增殖、细胞毒性实验的灵敏度比其它四唑盐如MTT, XTT, MTS高，并且对细胞几乎没有毒性。同仁化学并将其作为主要...
Cell Count Reagent SF 是一种基于 WST-8 的细胞计数试剂。WST-8 是一种四唑盐，类似于 MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐），但具有更高的灵敏度和更广的适用范围。这种试剂被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测中。细胞增殖实验中的应用：在细胞增殖检测中，Cell Count Reagent SF 通过...