1、Western blot实验技巧之蛋白样品制备、SDS-PAGE胶制备、跑电泳、转膜、孵育抗体、显影和ImageJ分析(来自一位可稳定重复WB结果的科研狗之四年经验总结) 2、“玄学”实验-Western blot的内参你选对了吗? 3、SDS-PAGE凝胶制备技巧,易翻车点及其解决方法汇总(五年经验结晶) 4、石蜡切片和冰冻切片之高质量HE染色、...
常配合ELISA、FACS、IHC、IF等手段使用。 最全的生物实验protocol与生物实验操作视频学习资料 112个科研软件免费版(数据处理+绘图+翻译+生物实验相关等) 下载链接:https://pan.quark.cn/s/34a75dd2 一、WB标准流程 样本制备→凝胶电泳→蛋白转膜→封闭→抗体孵育→检测显影 1.样本制备 1)实验前需要清楚的重要信息...
该透明胶状物为含有基因组DNA等复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检...
实验准备:滤纸,PVDF膜,甲醇,冰盒,1X转膜缓冲液(4℃预冷); 转膜:“三明治”模式电转,从负极到正极依次为转膜海绵、滤纸、胶、PVDF膜、滤纸、转膜海绵,即按转膜夹“黑胶白膜”顺序摆放; 转膜条件:转膜装置需冰水浴,90V恒压电转1-3h(视目的...
WB常规实验流程:蛋白提取→蛋白定量→制胶→电泳→转膜→封闭→一抗孵育→一抗洗脱→二抗孵育→二抗洗脱→化学发光→数据分析。 WB实验技术大全 Western blot实验原理及操作视频 Western blot实验操作 Western blotting经典文献汇总 Western blot蛋白质印迹实验原理与操作 ...
Western blot(蛋白印迹)作为科研研究中最为平常的实验,却蕴含了很多知识,可谓是小实验里却有大文章。尽管绝大多数研究僧在接触该实验时都会被虐的体无完肤,却也在和WB斗志斗勇的过程中积累了不少经验。正所谓前人种树,后人乘凉,现在小编就把各位前辈做WB的各种...
一、WB实验的基本原理：蛋白质免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除 ELISA 法外，也可用与检测 DNA 和 RNA 相类似的吸印方法。与Southern或Northern杂交方法...
前几天和同在实验室搬砖的小奕交流才知道目前国内很多实验室已经实现了高精度高速度的WesternBlot,常规2-3天的WB目前最快4小时内就
四、把蛋白质从凝胶转移到膜 膜可以是硝酸纤维素或PVDF，两者各具优点。用甲醇活化PVDF约1分钟，并在制备堆叠体之前用转膜缓冲液对PVDF进行冲洗。实验过程中需要对时间和电压进行优化（依据设备）。在封闭步骤之前采用丽春红染色法检查转膜，所得膜可用于抗体染色。五、抗体的染色1.用5%封闭溶液在室温条件下封闭膜...
实验流程 第一步:配胶 将配制好的分离胶用1ml枪快速灌入玻璃夹层,灌至绿带中间线高度即可 立即在胶上加上一层无水乙醇(可以消除气泡并有液封作用,液封后胶凝得更快),当乙醇和胶之间产生一条折射线时说明胶已凝固,此时再等5min左右使胶完全凝固后小心倒去上层无水乙醇,并用滤纸吸去残留的乙醇 ...