1. 各类缓冲液 1)电泳缓冲液:10xTris-Glycine-SDS电泳缓冲液(20319ES76),或参考配方1X:25 mM Tris, 192 mM Glycine, 0.1% SDS, pH 8.3 2)电转缓冲液:Western Blot电泳电转通用缓冲液(20329ES03),或参考Tris-Glycine缓冲液配方 3)蛋白上样缓冲液:5XSDS-PAGE蛋白上样缓冲液(20315ES05),或参考配方1X:0...
1、WB实验原理 免疫印迹(Immunoblotting)又称为蛋白质印迹(Western Blot,WB),是一种综合性的免疫学检测技术,用于检测细胞或组织提取物中的蛋白表达水平。 这项技术利用待检测蛋白与抗体的特异性结合,测定生物样本中的蛋白水平,已经被广泛应用并得到公认。 目前,WB技术已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性...
1、Western blot实验技巧之蛋白样品制备、SDS-PAGE胶制备、跑电泳、转膜、孵育抗体、显影和ImageJ分析(来自一位可稳定重复WB结果的科研狗之四年经验总结) 2、“玄学”实验-Western blot的内参你选对了吗? 3、SDS-PAGE凝胶制备技巧,易翻车点及其解决方法汇总(五年经验结晶) 4、石蜡切片和冰冻切片之高质量HE染色、...
探寻生命奥秘，蛋白免疫印迹（Western Blot）如一把生物学解码器，为我们揭示蛋白质的神秘面纱。它的原理简单而玄妙，通过电泳分离、传递和检测蛋白质，将微观的生命活动呈现在实验室的荧屏上。今天带大家学习蛋白免疫印迹western blot的基本原理和实践操作！简介 免疫印迹，又被称为蛋白质印迹（Western blot，WB），是...
免疫印迹,又被称为蛋白质印迹(Western blot,WB),是一种复合性的免疫学检测技术。该方法通过利用SDS-PAGE技术,在生物样本中将蛋白质分子根据其分子量在凝胶上进行分离,随后通过电转移的方式将这些蛋白质转移到固相膜上。固相膜上的蛋白质充当抗原,与相应的抗体发生免疫反应,接着与酶标记的第二抗体发生反应。最终,通...
Western Blot 1 一、所需试剂... 2 1、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒... 2 2、电泳液(可回收使用2次):配方见 三... 2 3、电转液:配方见 三... 2 4、TBST(4℃避光保存):配方见 三... 2 5、4X Laemmli样品缓冲液(-20℃保存)... 2 6、10-180kda 蛋白marker(-20℃保存1年,4℃ 3个月)... ...
蛋白免疫印迹（Western Blot）Buffer的准备 1）准备甲醇和ddH2O；2）配制1× PBST：500 mL 1× PBS+0.25 mL tween 20；3）配制5%的BSA封闭液：2.5 g的BSA溶解到50 mL 1x PBST中；4）配制一抗，二抗：用5%的BSA封闭液按说明书推荐比例稀释(一般新买的培养基可以进一步稀释使用)；5）10× running buffer...
一、WB实验的基本原理：蛋白质免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除 ELISA 法外，也可用与检测 DNA 和 RNA 相类似的吸印方法。与Southern或Northern杂交方法...
Western Blot(WB)即蛋白质免疫印迹试验,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。新学期的萌新们还在为初次显影的丑图愁眉苦脸吗?今天就跟非传统科普社一起来了解一下WB吧。 背 景 WB采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,将分离后的蛋白转移...
WB,(Western blotting),中文名蛋白质印迹,又称免疫印迹(immunoblotting),用于检测特异性目的基因表达的蛋白成分。 比如说你要用大肠或者酵母表达某种目的蛋白,把基因克隆到宿主后,要检测的目的蛋白的表达就可以用western blot。 总体来说有5个步骤,蛋白电泳,转膜,封闭,加抗体,以及检测。