Wes全自动蛋白质免疫印迹系统采用革新的Simple Western技术，颠覆30多年传统的Western Blot方法，实现在同一根样品管中完成样品分离、捕获、固定，免疫检测和定量分析。1、不用制胶和跑胶，不用转膜，减少实验步骤，避免样品损失，避免人工误差的引入，提高结果稳定性。2、自动进行一抗二抗孵育和化学发光检测，自动进行结...
WesternBlot是生物科研及制药研发等必备的实验技术。实验目的明确,技术原理清晰,但传统WesternBlot却面临经验依赖性强、操作步骤多、时间长、定量差、重现性不好等各种问题。想获得一幅条带漂亮规整、全膜呈现、定量准确的图片殊为不易。WB图片属于撤稿重灾区。 时代在发展,技术在进步。Western Blot已进入Digital Western...
实验操作演示视频:Western Blot 原理 蛋白质在SDS的作用下,全部都带上相同的负电荷,然后在凝胶里面进行电泳,分子量越小,逃跑的越快,这样子待检测的蛋白(目的蛋白)就集中逃跑在某一水平线。然后把蛋白质从凝胶转移到膜上,因为凝胶太软容...
与常见的看家蛋白相比,AzureRed表现出更强的相关性和更广泛的动态范围。 Sapphire配合AzureRed总蛋白荧光染色剂可以做总蛋白归一化和定量三个靶标蛋白,生成可以信赖的定量Western Blot数据。 Azure300带有Q模块,可激发AzureRed等染料进行全蛋白定量,最后化学发光条带和总蛋白条带同时在一张膜上成像,满足Nature,JBC等期...
不设内参行么,当然不行。不论是Western blot还是qPCR,内参的设置首先能够反映出实验过程是不是正常,包括电泳、转膜、发光这些步骤有没有问题。这个时候,内参的作用是充当空白对照。 其次我们再谈定量的问题:我们跑Western blot除了想知道目的蛋白在细胞/组织中是否表达,更重要的是想知道表达量的高低。Western blot条带...
以《Nature》期刊为例, 《Nature》允许对图片进行裁剪,但要在相应的图注中进行标注,并且要求在文章增补信息中必须提供完整的Western blots图片。要求裁剪处理后的图片必须有一定的宽度(上下各需6个条带宽度),不能太窄,否则会被认为遮挡了一些重要信息。高对比度的Western blots图片是不能接受的,因为这样会被认为是...
免疫印迹法(Western blotting) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。通俗来讲,将蛋白质通过电转固相到膜上,然后利用抗体检测蛋白表达的方法。与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法Southern blot相类似,亦被称为Western blot。 Western Blotting可用于: ...
对于Western blot分析,是否确实需要整膜带marker是一个经常被讨论的问题。实际上,许多高水平的科学出版物,如Nature Cell Biology等,都明确要求提供未经裁剪的原始凝胶或印迹图像,以确保数据的完整性和可重复性。这种要求旨在维护科学研究的严谨性和透明度。
如何实现定量Western Blot? 一、什么是定量Western Blot? 定量Western Blot:是指信号和靶蛋白量成很好的线性比例关系,如果用标准蛋白做标准曲线可以得到目的蛋白准确的定量信息,与Real-Time PCR(以下简称qPCR)有异曲同工之妙。文献中定量Western Blot使用最多的成像技术是LI-COR Odyssey双色近红外荧光成像,并且经查证...
WesternBlot是生物科研及制药研发等必备的实验技术。实验目的明确,技术原理清晰,但传统WesternBlot却面临经验依赖性强、操作步骤多、时间长、定量差、重现性不好等各种问题。想获得一幅条带漂亮规整、全膜呈现、定量准确的图片殊为不易。WB图片属于撤稿重灾区。