越来越多的SCI期刊强调,Western blot实验必须提供原始且未裁剪的凝胶/印迹图片,并保证结果的重复性。那么,什么是未裁剪图片?你真的明白吗?📊 以最近一篇在Nature Cell Biology上发表的文章为例,“Stiff matrix induces exosome secretion to promote tumour growth”(Nat Cell Biol. 2023 Mar;25(3):415-424. do...
关于《Nature》等期刊杂志对Western Blot图片的要求 以《Nature》期刊为例, 《Nature》允许对图片进行裁剪,但要在相应的图注中进行标注,并且要求在文章增补信息中必须提供完整的Western blots图片。要求裁剪处理后的图片必须有一定的宽度(上下各需6个条带宽度),不能太窄,否则会被认为遮挡了一些重要信息。高对比度的We...
Wes全自动蛋白质免疫印迹系统采用革新的Simple Western技术，颠覆30多年传统的Western Blot方法，实现在同一根样品管中完成样品分离、捕获、固定，免疫检测和定量分析。1、不用制胶和跑胶，不用转膜，减少实验步骤，避免样品损失，避免人工误差的引入，提高结果稳定性。2、自动进行一抗二抗孵育和化学发光检测，自动进行结...
实验操作演示视频:Western Blot 原理 蛋白质在SDS的作用下,全部都带上相同的负电荷,然后在凝胶里面进行电泳,分子量越小,逃跑的越快,这样子待检测的蛋白(目的蛋白)就集中逃跑在某一水平线。然后把蛋白质从凝胶转移到膜上,因为凝胶太软容...
二、为什么要对Western Blot进行定量分析? 分子生物学研究中,核酸水平的研究常用PCR的方法进行定性或半定量研究,用qPCR的方法进行定量分析;而在蛋白质水平的研究,传统的Western Blot仅能进行定性或半定量研究,想要实现准确的定量研究,必须使用定量Western Blot的方法。很多发表的文章中都采用qPCR方法对mRNA表达水平进行定量...
免疫印迹法(Western blotting) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。通俗来讲,将蛋白质通过电转固相到膜上,然后利用抗体检测蛋白表达的方法。与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法Southern blot相类似,亦被称为Western blot。 Western Blotting可用于: ...
上图完美的Western Blot条带出于Nature Chemical Biology 上的文章:“Recruitment of FBXO22 for targeted degradation of NSD2”。本篇文章作者描述了一种靶向蛋白质降解(TPD)策略,涉及招募FBXO22诱导组蛋白甲基转移酶和致癌基因NSD2的降解。在携带NSD2功能获得性突变p.E1099K的急性淋巴细胞白血病细胞中,UNC8732促进...
以《Nature》期刊为例, 《Nature》允许对图片进行裁剪,但要在相应的图注中进行标注,并且要求在文章增补信息中必须提供完整的Western blots图片。要求裁剪处理后的图片必须有一定的宽度(上下各需6个条带宽度),不能太窄,否则会被认为遮挡了一些重要信息。高对比度的Western blots图片是不能接受的,因为这样会被认为是...
对于Western blot分析,是否确实需要整膜带marker是一个经常被讨论的问题。实际上,许多高水平的科学出版物,如Nature Cell Biology等,都明确要求提供未经裁剪的原始凝胶或印迹图像,以确保数据的完整性和可重复性。这种要求旨在维护科学研究的严谨性和透明度。
Nature Methods:单细胞western blot 美国加州大学伯克利分校(UC Berkeley)生物工程系的研究人员开发出一种单细胞western blot(scWestern)方法。具体来说,它采用一块可扩展的开放式微孔芯片结构,能在4小时内同时分析~2000个细胞。他们应用这种方法来研究体外刺激下的干细胞信号和分化反应。