在前几期的Western blot曝光及数据展示的学习后,不少同学发现,虽然我能曝出条带,但是又出现了新的问题:我的目的条带不在它预计的位置,比如我的目的条带预计在55kD左右,但是与marker比对后,在蓝色55kD大小的marker平行的曝光条带中并未看到目的蛋白条带,而是在蓝色55kD与40kD之间看到一条较浓的蛋白条带,为了解...
先别慌!(二) Western blot蛋白条带不在预计位置的可能原因和解决办法(详见往期回顾)。在排除了蛋白预染marker或者制备的蛋白样品等问题后,可能大部分同学出现蛋白条带位置异常的问题已得到解决。但如果你跑的蛋白可参考的资料较少,抗体说明书上也没有预计的蛋白大小,你该怎么办呢?今天再教给大家两个方法,轻松解决条...
如图所示,10%的胶,出现marker之间的距离过长,由于在跑的过程中已经出现,遂考虑配胶及跑胶的问题,先后换了新的丙烯酰胺、10% SDS、Tris-Hcl缓冲液、Temed均未改善,最后考虑到是否是10% APS于常温放置过久导致,更换新的4度的APS,恢复正常条带 其次,出现拖尾现象,70的条带模糊不清,考虑赛默飞该批次的26616本身...
爱企查为您提供北京博泰斯生物技术有限公司Westernblot转印滤纸 即用型 可替换伯乐1703932 200片等产品,您可以查看公司工商信息、主营业务、详细的商品参数、图片、价格等信息,并联系商家咨询底价。欲了解更多试剂盒、一步法快速制胶试剂盒信息,请访问爱企查!
WB排版顺序1234567膜1markerM1M2M3M4M5M6 4.2 抗体稀释比例 序号指标稀释比例1AGO21:1000 注:具体实验结果详见:“原始曝光图片” 附件:配胶比例: 试剂10%分离胶水4mL30%丙烯酰胺3.3 mL1.5M TRIS-Hcl(PH:8.8)2.5mL10%SDS0.1mLAP0.1mLTEMED5ul总体积10mL ...
In addition to our highly validated** antibodies, we offer a complete toolbox of products to help you troubleshoot your western blot, from preserving protein yield during sample prep to optimisation signal sensitivity. Limited time offer: Add 1000 EUR worth of eligible products from...
26610Pierce™ Unstained Protein MW MarkerEach 757.00 26614PageRuler™ Unstained Protein Ladder, 2 x 250 mLEach 1,058.00 NuPAGE Precast Protein Gels – 50% off Catalog #NameSizePrice (HKD)Qty NP0301BOXNuPAGE™ 10%, Bis-Tris, 1.0 mm, Mini Protein Gel, 10-well, 10 gels (1 box)Each...
3.1.1.细胞样品加入400ml的裂解液(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)。设置匀浆程序进行匀浆;如果需要提高蛋白浓度,可以适量减少裂解液体积。 3.1.2. 将匀浆完成的匀浆管取出,放置冰上裂解液30min,每隔 5min震荡一次确保组织完全裂解。 3.1.3. 17000g,4℃,离心 10min,收集上清,即为总蛋白溶液。
5.电泳前准备好:待测蛋白、Marker、1*running buffer。蛋白在沸水中煮3-5min。(第二次后不用煮沸) 6.拔梳子,立即用1*running buffer冲洗孔道(用塑料吸管)。 7.将玻璃板取出,固定于电泳槽(短面冲里-相对),也要牢固,可先将电泳液倒入两玻璃板槽间观察是否渗漏。 注:标记号1、2板及左右。 8.固定好后,...
在前几期的Western blot曝光及数据展示的学习后,不少同学发现,虽然我能曝出条带,但是又出现了新的问题:我的目的条带不在它预计的位置,比如我的目的条带预计在55kD左右,但是与marker比对后,在蓝色55kD大小的marker平行的曝光条带中并未看到目的蛋白条带,而是在蓝色55kD与40kD之间看到一条较浓的蛋白条带,为了解...