遵循以上步骤和注意事项，将有助于提高Western Blot实验的成功率和数据质量。为了顺利开展实验，还需要准备相应的仪器、耗材和试剂，如高速匀浆机、超声仪、组织破碎机等用于样品制备；BIO-RAD垂直板电泳转移装置或NOVEX iBlot蛋白快速电泳/干转印系统等用于电泳和转膜操作。空气浴加热器：用于维持恒温环境，确保实验条件...
产地:国产|进口 规格:10×1L 英文名:Western semi dry membrane fluid 本Western半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液,没有使用剧毒的甲醇,也没有使用其它的有毒试剂。配制Western 半干法转膜液的方法非常便捷,不需
使用前1 ml 1×SDS裂解液加2.5μl PMSF,1μl NaF和1μl钒酸钠。终浓度为1 mM PMSF、5mM NaF和1mM钒酸钠。 注:氟化钠和钒酸钠是磷酸酶抑制剂,因此如果检测磷酸化蛋白,必须在1×SDS裂解液中加入这两种抑制剂。 1.悬浮细胞:离心收集,PBS洗涤3次,最后一次转移至1.5ml管中,并计算细胞数。按比例加入1×SD...
★ 载荷面积:如果你的胶槽是5mm×1mm,则载荷面为:1mm×5mm=5mm2④为确保Western Blot实验结果的准确性,一般需要设置合适的实验对照:★ 阳性对照:最好有标准品(比如β-actin,GAPDH)或阳性血清★ 阴性对照:测血时用相应小鼠未免疫血清(即正常血)★ 空白对照:不加一抗,用PBS代替⑤ 电泳时上层胶用60-80V电压,...
商品名称:Westernblot湿转转印滤纸转膜滤纸1mm厚7.510cm伯乐 (7.510cm) 1mm厚 10张 伯乐款 商品编号:10092560370572 店铺:梵多工业品专营店 货号:418616 适用机型:其他 类别:其他 更多参数>> 商品介绍加载中... 售后保障 卖家服务 京东承诺 京东平台卖家销售并发货的商品,由平台卖家提供发票和相应的售后服务。请您...
★载荷面积:如果你的胶槽是5mm×1mm,则载荷面为:1mm×5mm=5mm2 ④为确保WesternBlot实验结果的准确性,一般需要设置合适的实验对照: ★阳性对照:最好有标准品(比如β-actin,GAPDH)或阳性血清 ★阴性对照:测血时用相应小鼠未免疫血清(即正常血) ★空白对照:不加一抗,用PBS代替 ...
Western Blot印迹常用的转移膜主要是硝酸纤维素膜(Nitrocellulose Blotting Membranes,NC)和PVDF膜,此外也有用尼龙膜、DEAE纤维素膜做蛋白印迹。选择的根据主要有:a.膜与目的蛋白分子的结合能力(也就是单位面积的膜能结合蛋白的载量),以及膜的孔径(也...
-硼酸:1mM -EDTA:5mM - Tween-20:0.1-0.2% -低脂牛奶粉(非脂奶粉):5-10% -NaN3:0.02% 不同实验室和研究人员可能会根据实际需要进行配方上的调整。 以上是一些Western blot相关的缓冲液配方。然而,需要根据实际实验的要求和蛋白质的特性进行优化和调整。所以在进行Western blot实验时,研究人员应该根据具体的实验...
2）上样蛋白量不应超过30ug/mm2 (载荷面即：如果你的胶槽是5mm×1mm，则载荷面为：1mm×5mm=5mm2...
② 上样蛋白量不应超过30ug/mm2 (载荷面即:如果你的胶槽是5mm×1mm,则载荷面为:1mm×5mm=5mm2) 。 ③ gel通常在0.5-1h内凝集最好,过快表示TEMED、APS用量过多,此时胶太硬易龟裂,而且电泳时容易烧胶。太慢则说明两种试剂用量不够或者系统实际不纯或实效。