蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot:它是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置、深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。 WB分很多种,比如SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-polyac1ylarnide gelelectrophoresis, SDS-PAGE)、Native-PAGE等,比较常用的是...
原理:Western Blot(蛋白质印迹或免疫印迹)技术,以蛋白质为检测对象,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。实验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将样品蛋白质分离,再转移到固相载体(PVDF尼龙膜或NC膜)上;固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变;然后以固相载体上的蛋白质或多肽...
一、WB实验的基本原理:蛋白质免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除 ELISA 法外,也可用与检测 DNA 和 RNA 相类似的吸印方法。与Southern或Northern杂交方法...
基本原理 免疫印迹(Western Blot) 采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。SDS-PAGE 可对蛋白质样品进行分离,转移到固相载体——例如硝酸纤维素薄膜(NC)上。固相载体可以吸附蛋白质,并保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。转移后的 NC 膜就称为一个印迹(blot...
一、实验原理Western Blot实验的原理是基于抗原-抗体反应的特异性。将样品中的蛋白质进行电泳分离后,转移到膜上,然后与特异性抗体进行孵育,形成抗原-抗体复合物。通过显色反应,可以检测出目标蛋白质的存在及其相对分子量。二、实验步骤1.样品准备:收集待检测的组织或细胞样品,用蛋白提取液提取蛋白质。2.电泳:将...
Western Blot即蛋白质印迹法(免疫印迹试验),是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。它是将电泳分离后的细胞或组织中蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方...
实验原理 蛋白质免疫印迹法,即Western Blot,基本原理涉及通过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)对蛋白质样品进行分离,随后将其转移至固相载体,如硝酸纤维素薄膜(NC膜)或PVDF膜。固相载体以非共价键方式吸附蛋白质,同时能够保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性的不变性。在该过程中,固相载体上的蛋白质或多肽被作为抗原...
蛋白免疫印迹法 Westernblot WesternBlot的原理 ❖WesternBlot:首先利用SDS-PAGE对蛋白质样品进行分离,然后转移到 固相载体例如NC膜上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变.转移后的NC膜就称为1个印迹blot,用于对蛋白质的进1步检测.印迹首先用蛋白溶液如5%的BSA或脱脂...