Western Blot(蛋白免疫印迹)是一种重要的蛋白质检测技术,广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等领域。通过将电泳分离后的蛋白质从凝胶转移到固相支持物(如NC膜或PVDF膜)上,然后用特异性抗体检测特定抗原,实现对蛋白质的定性或定量分析。 🔍 实验目的 研究体外蛋白质分子是否存在 研究目的...
一、Western Blot 原理 Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽...
Western blot的基本原理可以分为以下几个步骤: 蛋白质分离:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对样品中的蛋白质进行分离,依据蛋白质的分子量进行分离。 转膜:将分离后的蛋白质转移到固相支持物(如PVDF或硝酸纤维素膜)上,使蛋白质在膜上固定。 封闭:用不含目标蛋白的蛋白质(如牛血清白蛋白BSA或脱脂奶粉)封闭膜上的非特...
Western blot的原理是一种基于抗原-抗体特异性结合和电泳分离技术的蛋白质分析方法,其核心步骤包括蛋白质的电泳分离、转移固相化以及特异性抗体检测。 首先,Western blot的起始步骤是蛋白质的电泳分离。在这一过程中,混合的抗原样品被置于凝胶板上,并通过单向或双向电泳进行分离。电泳是利用...
一、实验原理 Western blot（也称为蛋白质免疫印迹）是一种常用于研究中分离和鉴定蛋白质的技术。它利用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质，然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或 PVDF 膜上，接下来将膜与对感目标蛋白质的特异抗体一起孵育。在洗膜过程中，未结合的抗体被...
一、WB实验的基本原理：蛋白质免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除 ELISA 法外，也可用与检测 DNA 和 RNA 相类似的吸印方法。与Southern或Northern杂交方法...
WB实验原理WB experimental principle免疫印迹(Immunoblotting)又称为蛋白质印迹(Western Blot,WB),是一种综合性的免疫学检测技术,用于检测细胞或组织提取物中的蛋白表达水平。 这项技术利用待检测蛋白与抗体的特异性结合,测定生物样本中的蛋白水平,已经被广泛应用并得到公认。
一、 原理 Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质。“经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与...