如果以溴酚蓝跑到胶的底部为准,26kD在10%的由下往上1/4的地方,而15%就在由下往上大约1/2(不太确定)的地方,对于分子量比较小的蛋白,当然是胶的浓度越大,分离效果越好.但是你必须考虑到,胶的孔径一旦小于蛋白-SDS复合体的直径,分子量大于这个蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分离效果.如果孔径太大,所有蛋白都...
western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白 而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下 所以western blot中分...
Western blot中,分离胶的浓度与蛋白质大小(kDa)的关系基本上是:分离胶的浓度越高,其分离的蛋白质分子量范围越小。具体来说: 1.低浓度的胶(比如5%)更适合分离大分子量的蛋白质(比如大于200 kDa)。 2.中等浓度的胶(比如10%-12%)通常用于分离中等分子量范围的蛋白质(比如25-200 kDa)。
结果一 题目 做western blot,怎样根据分子量的不同配置不同浓度的浓缩胶比如我要做的蛋白是HIF-1α,其分子量为120KD,应该配多少浓度的分离胶? 答案 用10%的比较好相关推荐 1做western blot,怎样根据分子量的不同配置不同浓度的浓缩胶比如我要做的蛋白是HIF-1α,其分子量为120KD,应该配多少浓度的分离胶?
western blot浓缩胶和分离胶浓缩胶的浓度比较低(5%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺),里面的孔径也比较大,所有的蛋白都能够在进入分离胶之前在同一水平线上(因为在你加样的时候蛋白是分布在加样孔中的,不在同一水平线上,就像运动员都不在起跑线上一样,无法比较)。
蛋白分子量大小不同,所使用的分离胶浓度也不同,常用浓度有6%、8%、10%、12%,分子量越大,所用的胶浓度越低,蛋白电泳速度越快。浓缩胶浓度均为 5%。分离胶的选择:蛋白分子量很小时,推荐使用10-12%,例如蛋白分子量为 21kd 和 34kd ,选取的胶浓度为10%;分子量80kd,选10%;分子量180kd,选6%。
远了到了颓圮的篱墙走尽这雨巷 在雨的哀曲里消了她的颜色散了她的芬芳消散了、悠长又寂寥的雨巷我希望逢着一个丁香一样地结着愁怨的姑娘 她是有丁香一样的颜色丁香一样的芬芳丁香一样的忧愁在雨中哀怨哀怨又彷徨 她彷徨在这寂寥的雨巷撑着油纸伞像我一样像我一样地默默彳亍着寒漠？ 雨巷 作者，...
做大分子蛋白的WB时，分离胶最好选择>7%的，并且在剥胶时要小心，避免损坏。推荐湿装转膜，效果稳定，...
增加封闭液孵育时间，或者提高温度。选择合适的封闭试剂（脱脂奶粉，BSA，酪蛋白等）。(3)二抗浓度过高 ...
Western blot主要包括三个步骤:电泳分离蛋白质、转移蛋白质到膜上、蛋白质的检测。 浓缩胶的原理: 在Western blot过程中,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质混合物。浓缩胶将用于浓缩要分析的特定蛋白质区域。浓缩胶一般由较高浓度的聚丙烯酰胺胶和较低浓度的腺苷三磷酸铵组成。当电场施加到聚丙烯酰胺胶上时,腺苷三磷酸...