WB,IP,IHC,IF,ChIP,FC抗体的区别 WB:蛋白质印迹是生命科学实验中一项常见的分子生物学实验技术,原理为利用电泳(SDS-PAGE)分离蛋白质,接着将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法,通过分析条带大小和显色信号获得目标蛋白质在所分析的细胞或组织样本表达情况的信息。由于蛋白质进行电泳前进行加热变性,破坏了...
但是如果CHIP的抗体识别的是构象表位(比如是由两个实际靠在一起但变为线性结构之后相隔很远的两端序列),而不是线性表位,这种CHIP抗体做不了WB。 f.抗体说明书上面没有写该抗体能够用于某项实验怎么办? 一般而言,抗体研发出来之...
因此在做IHC/IF实验中,最合适是用重组蛋白作为抗原制备出来的抗体,除此之外也可以是人工合成多肽作为抗原制备出来的抗体。如果所用的抗体识别的是线性表位(例如识别蛋白上连续的几个氨基酸)那么这种抗体则可以同时用于IHC和WB,而如果抗体识别的是构象表位,则只能用于IHC。IP/CHIP IP(Immunoprecipitation,免疫沉淀):...
因此在做IHC/IF实验中,最合适是用重组蛋白作为抗原制备出来的抗体,除此之外也可以是人工合成多肽作为抗原制备出来的抗体。如果所用的抗体识别的是线性表位(例如识别蛋白上连续的几个氨基酸)那么这种抗体则可以同时用于IHC和WB,而如果抗体识别的是构象表位,则只能用于IHC。 IP/CHIP IP(Immunoprecipitation,免疫沉淀):是...
WB,IP,IHC,IF,ChIP,FC抗体的区别 WB:蛋白质印迹是生命科学实验中一项常见的分子生物学实验技术,原理为利用电泳(SDS-PAGE)分离蛋白质,接着将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法,通过分析条带大小和显色信号获得目标蛋...
CHIP和IP没有太大的区别,唯一的问题在于,如果抗体识别的表位和该蛋白质与DNA结合的部位一致,则会导致CHIP实验的失败。3、 IF/IHC(免疫荧光和免疫组化)免疫荧光和免疫组化中需要进行固定一步,固定是为了尽量让细胞的形态结构维持和原有的一致。这种化学物质的固定使蛋白质变性凝固,与天然状态下的蛋白质有了...
WB、IHC、ChIP各种实验的抗体有什么区别? 说到-抗体相信各位科研达人一定不会觉得陌生,什么一抗,二抗,单克隆,多克隆,做WB、IP、IHC、IF、ChIP、FC各种专业名词闭着眼睛都能背出来,如今随着科研方向越来越广泛抗体的种类也日渐增多,如何在抗体大军中挑选出吻合实验的抗体对实验的成败显得尤为重要,今天就让我们来学习...
通常WB/FC抗体稀释浓度为1:1000,IP/IF/IHC为1:100,而如果可以做ELISA则可以稀释1:10000。如果一个抗体用来做ELISA的,那么言外之意就是该抗体效价不高。但不是说ELISA的抗体不能用于做WB,抗体说明书提示做ELISA稀释比例为1:10000,那么你可以试试1:1000做WB。
但也有特殊情况,例如图一中Rb(4H1)Mouse mAb(9309),此抗体为单克隆抗体,但是经过实验验证,发现其居然适用WB、IP、IHC、IF、F、CHIP等所有实验。推测此抗体的抗原只含有线性抗原表位,并且抗原表位暴露在蛋白质表面,没有包裹在蛋白内部而无法识别,那这个抗体就有可能适用上述提到所有方法学实验,在适用范围验证过程中...
一般而言,抗体研发出来之后都要经过WB,IP,IF,IHC实验。当发现浓度不够做IF,IHC时候,国外的抗体一般都是写未检测,国内的抗体一般是不写。所以尽量不要抱着试试的心里去尝试,往往只会浪费时间。你想啊,如果抗体能够做该实验,他们肯定会写上去啊。 g. 做ELISA的抗体能否用来做WB?