40-45ul左右。1mm,10个孔和1。5mm,15个孔差不多,基本上都在40-45ul左右。1mm,15孔的要稍微少一点,基本上30多一点。1.5mm,10个孔的多一点,大概能到50。
1.5mm10孔的梳子上样量 大约是3个左右。 也要根据实际的销售情况而定,卖的好自然上样量大。 1mm的wb板子上样多少ul 40-45ul左右。1mm,10个孔和1。5mm,15个孔差不多,基本上都在40-45ul左右。1mm,15孔的要稍微少一点,基本上30多一点。1.5mm,10个孔的多一点,大概能... wb过程中的上样体系如何计算?
这个还得看您用的厚板是1.5mm,还是1.mm的,一般都可以容纳10ul以上的样品,但是不建议上的样品量太大,太大后面曝光条带可能会连在一起。
wb15孔梳子能上10ug样。平时做15孔上样量10ug基本没问题,如果是之前没做过的蛋白,第一次跑的话要多加些,上15ug。蛋白定量时浓度别太高,否则上样液体体积太少,容易导致条带不匀或者弯曲。 00分享举报您可能感兴趣的内容广告 <淘宝>梳子十大品牌排行榜,家居超值商品,抢大额优惠 梳妆台哪个牌子好-京东家具城...
在4℃低温下裂解10分钟,然后采用超声细胞破碎仪以20%功率冰浴破碎1分钟。 使用低温离心机在4℃、15000 rpm下离心20分钟,收集上清液即为细胞总蛋白。 裂解液体积参考:6孔板每孔100 ul;5mm培养皿每皿300 ul;10mm培养皿:5 mm培养皿每皿500 ul;组织蛋白每100 mg组织加入1 ml裂解液。
为什么跑WB的时候,同一标本,一样的上样量,同时做很多个孔,特别10个孔的时候,会出现中间条带浅,两边条带深?怎么才能避免这个呢? J&Z橘子皮 2021-02-23 10:31 评论( 0 ) 浏览( 10996 ) 收藏 一般和转膜有关,应该是转膜时候受力不均,可以考虑换夹子,或者加滤纸;...
刺激结束后,弃旧培养液,每个孔中加入100μL的0.075-0.1%的中性红溶液(PBS或培养基配制),孵育1-2h后,PBS洗去多余染色液。然后在每个孔中加入100-200μL的细胞裂解液(乙醇:乙酸v/v=1:1或乙醇:1...如何选择合适的培养基 1.常见基础的培养基有BME、MEM、DMEM、RPMI1640、DMEM/F12等。基础营养成分包括氨基酸...
WB 是实验室常见实验之一,蛋白定量后,上样之前,还需要哪些步骤制样呢?1. 蛋白含量测定后,Invent 建议大家把各个样品稀释到某一固定浓度(稀释可使用 PBS,水或裂解液),等体积等质量上样,计算上样体积时需包含 loading buffer 的体积。例如:把所有蛋白浓度都稀释到 2ug/ul,然后与 2Xloading buffer 1:1 混合后...
B :注意事项及常遇到的问题1)分离胶不要倒的太满,需要有一定的浓缩胶空间,否则起不到浓缩效果。2)上样蛋白量不应超过30ug/mm2 (载荷面即:如果你的胶槽是5mm×1mm,则载荷面为:1mm×5mm=5mm2) 。3)gel通常在0.5-1h内凝集最好,过快表示TEMED、APS用量过多,此时胶太硬易龟裂,而且电泳时容易烧...
取出上样样品至200卩I的EP管中,加入5X SDS上样缓冲液至终浓度为 1X(上样缓冲液与样品蛋白体积之比为1:4)。(上样体积一般在10卩I与20卩I之间)(其实大一点的垂直电泳槽每孔最大上样量可以达到40卩I,胶做得很好的话,50卩I问题也不大)上样前要将样品100 C加热5-15min使蛋白变性,立即冰浴,然后低速...