显色蛋白质印迹检测 荧光蛋白质印迹检测 正确的抗体对于得到干净、可靠和可重复的蛋白免疫印迹结果至关重要。我们提供超过16 万种高特异性和高灵敏度的一抗和二抗,帮助您收集高质量的蛋白免疫印迹实验数据。我们所有的抗体都经过验证...
1、Western blot实验技巧之蛋白样品制备、SDS-PAGE胶制备、跑电泳、转膜、孵育抗体、显影和ImageJ分析(来自一位可稳定重复WB结果的科研狗之四年经验总结) 2、“玄学”实验-Western blot的内参你选对了吗? 3、SDS-PAGE凝胶制备技巧,易翻车点及其解决方法汇总(五年经验结晶) 4、石蜡切片和冰冻切片之高质量HE染色、...
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WB实验的原理其实很简单,就像是给蛋白质“拍照”,然后用抗体去“认出”目标蛋白质。具体来说,就是通过电泳分离蛋白质,然后把它们转移到膜上,用特异性的抗体去标记目标蛋白质,最后通过化学发光或荧光检测来确定目标蛋白质的位置和数量。📸 🌟三、WB实验的“超级流程”🔍 蛋白质提取 从细胞或组织中提取蛋白质,...
这期我们将主要介绍WB实验的抗体孵育详情,大家可以分享自己的实验经验和想法 抗体孵育 1、原理: 目的蛋白印迹在膜上,经过封闭之后,印迹目的蛋白与一个或多个抗体孵育。第一个抗体(一抗)与目的蛋白结合,而第二个抗体(二抗)与第一个抗体结合,二抗本身结合有酶或染料,可用来指示蛋白的位置。不过有些一抗也具有直接...
🧪 抗体洗脱液配方: 取0.5mol/L的Tris-HCl(pH=6.8)25ml、4g SDS和1.4ml β-巯基乙醇,加纯水定容至200ml,即可制成抗体洗脱液。🔍 磷酸化抗体的选择: 选择合适的磷酸化抗体是实验成功的关键。非磷酸化的抗体可以识别非磷酸化的蛋白和磷酸化的蛋白,而磷酸化的抗体只能识别磷酸化的蛋白。因此,需要根据实验目的...
本蛋白印迹膜再生液可有效去除PVDF膜或者NC膜上结合的一抗二抗,同时温和作用维持蛋白的完整性不受影响。本品不含常用的β-巯基乙醇,室温下使用即可,可重复利用膜5次。洗脱后可直接进行封闭等后续的WB步骤。 存储条件 室温运输。4℃保存,一年有效。 FAQ
特异性:特异性针对α-微管蛋白 应用 WB:1:1000至1:5000(AP染色)IP:尚未测试 ICC:1:500(见备注)IHC:1:500 IHC-P:尚未测试 备注:该抗体是基于单克隆小鼠抗体F2C的嵌合抗体。重链和轻链的恒定区已被替换为兔特异性序列。因此,该抗体可以与标准的抗兔二抗一起使用。该抗体在哺乳动物细胞中表达,并在...
一、WB实验的基本原理:蛋白质免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除 ELISA 法外,也可用与检测 DNA 和 RNA 相类似的吸印方法。与Southern或Northern杂交方法...
抗体结合是WB实验的核心步骤,主要包括一抗孵育、洗涤、二抗孵育和洗涤等过程。1. 一抗孵育:将特异性一抗添加到转膜后的膜上,孵育过程中一抗与目标蛋白质发生结合,一抗的浓度和孵育时间需要根据实验需求进行调整;一般情况下,一抗的浓度在1:1000-1:10000之间,孵育时间为1-2小时,在孵育过程中,需要保持膜的...