一抗:GAPDH抗体(Cell Signaling Technology,2118),按说明书用TBST按照1:5000稀释抗体,4℃摇床孵育过夜,TBST中洗涤4次,每次5min。 二抗:Anti-rabbit IgG (H+L) (DyLight™680 Conjugate)近红外荧光抗体(Cell Signaling Technology,53...
建议通过浓度梯度和时间梯度确认最佳稀释比例和孵育时间。 洗膜并准备二抗:去除一抗孵育液后,用TBST快速冲洗2次,再充分洗膜3次,每次15分钟。洗膜时,根据建议稀释二抗,确保二抗孵育液充分混匀。荧光二抗光敏感,孵化时应避光。 二抗孵育:去除TBST后,将膜浸没在二抗孵育液中,放置在摇床上避光孵育1小时。孵育后,重复...
2. 荧光WB实验→选择带有荧光基团的Whole IgG二抗与化学发光WB实验所使用的酶标记二抗不同的是，荧光WB需选择带有荧光基团的二抗（如FITC/Dylight/Alexa Fluor荧光二抗）。此外还需要搭配有合适光源和滤光片的成像仪器，如奥德赛、Bio-rad等。图4.使用带有Alexa fluor®680和Alexa fluor®790基团的二抗进行荧光WB...
2)通过使用不同抗体和凝胶成像仪器可得到四重荧光图像,靶标蛋白浓度与荧光信号强度呈线性关系,实现真正的定量要求。 图1:荧光WB和化学发光WB原理图荧光WB VS 化学发光WB: 荧光二抗和荧光WB更配,适合做荧光WB的二抗有:1.山羊抗小鼠IgG二抗, 近红外DyLight 680荧光标记,A237102.山羊抗小鼠IgG二抗, 远红外Dy...
荧光二抗确实与荧光WB非常相配。以下是荧光二抗与荧光WB相配的主要优势：实验流程更便捷：荧光二抗直接绑定特异性一抗，省去了传统Western Blot中胶片和显影液的繁琐步骤，使得实验流程更加便捷。多色荧光标记提升效率：荧光WB借助多色荧光标记的二抗，能在一次实验中同时呈现多重图像，满足了对多个蛋白靶点的...
荧光WB的威力在于其使用了如下的荧光二抗：山羊抗小鼠IgG二抗，分别标记为近红外DyLight 680（A23710），远红外DyLight 800（A23910），绿色DyLight 488（A23210），以及橙红色DyLight 594（A23410），这些荧光标签为实验者提供了多样化的颜色选择，以便于更精确的蛋白定位和多重靶点分析。通过这些二抗，...
作为专业的生命科学医药原料供应商,艾美捷科技为您推荐Rockland荣誉产品,荧光WB专用二抗!稀释比:>1:10000 * 以上抗体均经过多种属血清进行预吸附,将非特异性交叉反应降至最低水平. * Rockland荣誉出品..仅供科研使用,不得用于医疗. Rockland荧光二抗广泛的设备兼容性: Rockland荧光二抗的荧光参数:...
洗膜并准备二抗 • 去除一抗孵育液并开始洗涤步骤. • 洗膜液使用 TBST,先快速冲洗2次,然后充分洗膜3次,室温,每次15分钟. • 洗膜时,配置二抗孵育液,根据建议(见下表1)稀释二抗.确保二抗孵育液充分混匀. 荧光二抗 都是光敏感的,孵化时应避光. • 去除TBST并孵育二抗,放置在摇床上,避光孵育1小时....
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荧光WB技术，因其无需胶片和显影液，且能实现真正的定量要求，相较于传统Western Blot显色方法，如放射自显影、底物化学发光ECL、底物DAB呈色，展现出明显优势。荧光WB与化学发光WB对比，荧光WB以其独特优势脱颖而出。其使用荧光二抗与特异性一抗结合，简化操作流程，极大提升实验效率。通过特定抗体与凝胶...