在进行Western Blot实验时,选择合适的膜至关重要。目前常用的膜主要有硝酸纤维素膜(NC)和聚偏二氟乙烯膜(PVDF)。🌿 硝酸纤维素膜(NC) NC膜通过疏水作用与蛋白质结合,无需预先活化,对蛋白质活性影响较小。 非特异性本底显色较浅,价格实惠,使用方便。 然而,小分子蛋白与NC膜的结合力较差,洗涤时容易丢失。 NC...
每种膜都有其独特的优势和适用场景。 PVDF膜: 蛋白吸收性能好:PVDF膜的蛋白吸收能力比NC膜更强。 稳定性好:不易破裂或卷曲,适合多次使用。 需要活化:使用前需要用乙醇、甲醇或其他适当溶液浸泡活化。 NC膜: 常用选择:0.45μm孔径的NC膜适用于大多数蛋白质检测。 背景较低:比表面积较小,背景较低。 选择膜的...
02选择膜孔径选到合适材质的膜之后,还需要根据检测蛋白的大小,选择合适的膜孔径。Western Blot转印膜通常有两种孔径大小:0.2μm和0.45μm。推荐产品:1. Immobilon®-P 0.45um最常用的WB转印膜,适用于一般的免疫印迹应用。(货号:IPVH00010)0.45μm:更加常用,适合大...
无需甲醇润湿的PVDF膜选择 为了进一步提升Western Blot（WB）技术的成功率，默克公司推出了无需甲醇激活的改良PVDF膜——Immobilon®-E即用型PVDF膜。这款膜在转印前无需使用甲醇溶液进行预润湿，直接采用标准转印缓冲液即可。相较于传统的NC膜，Immobilon®-E即用型PVDF膜不仅继承了PVDF膜的优异性能，如出色的操...
根据杂交方案、被转移生物大分子的特性以及分子大小等等因素,我们要量体裁衣,从杂交膜的材质、孔径和规格上都要做出合理的选择。 硝酸纤维素膜:硝酸纤维素膜是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力...
WB转膜:PVDF膜和NC膜该如何选择? 在Western Blot实验中,选择合适的转印膜至关重要。目前,最常用的两种转印膜是PVDF膜(聚偏二氟乙烯膜)和NC膜(硝酸纤维素膜)。 🌿 NC膜:低背景,多功能应用 NC膜以其低背景和良好的蛋白质结合能力,适用于多种印迹技术,如蛋白质印迹法、RNA印迹法、DNA印迹法和斑点杂交技术。
在WB实验中,选择合适的膜材料对于实验结果的准确性至关重要。NC膜和PVDF膜是两种常用的膜材料,它们在结合不同分子量的蛋白时表现出不同的特性。以下是它们在结合不同分子量蛋白时的对比: 1️⃣ NC膜对低分子量蛋白的结合力优于PVDF膜:NC膜能够更有效地捕获低分子量蛋白,确保这些蛋白在实验中不会丢失。 2...
一般而言,NC 膜越纯,其蛋白结合 能力就越高,所以要增加 WB 的灵敏度和分辨率,提高所使用膜的纯 度是个可以考虑的选择。如果 NC 膜搀杂一些醋化纤维素——这在前 面已经提到,会影响蛋白质结合。而 Protran 在制作过程中去除了各 种杂质,保证了其纯度,从而增加了蛋白结合能力。除了这一点以外, Protran 还有...
WB膜的选择 以下信息来源于百度文库 首先来比较下这几种膜的特点 NC膜 尼龙膜 PVDF膜 灵敏度和分辨率 高 高 高 背景 低 较高 低 结合能力 80－110 ug/cm2 >400 ug/cm2 125－200 ug/cm2（适合于SDS存在下与蛋白质的结合） 材料质地 干的NC膜易脆 软而结实 机械强度高 溶剂耐受性 无 无 有 ...
内参的选择 在western blot(WB)实验中内参蛋白是非常重要且必须的一部分,内参蛋白通常是由细胞中管家基因编码的蛋白,内参保证了每个泳道中蛋白上样量相同,不同泳道上的蛋白以相同的效率从凝胶转到膜上,不同泳道上抗体孵育(包括一抗和二抗)、信号检测都是一致...