Western Blot技术从提出至今已经有四十余年的时间了,如今仍然广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。然而想要得到一张条带清晰、没有杂带、背景干净的图片,还是具有一定挑战性的,即使出现了有问题的条带也不用慌张,里来分享结果条带图示+全面分析,方便大家优化WB实验进程与结...
一键搞定WB实验结果分析处理方法:视界学术平台:生物科研的AI图像分析工具! AI图像识别:强大的AI技术,让图像识别更精准、更高效。多功能软件:覆盖Western blot、病理染色、免疫组化等多种应用(持续研发),满足你的各种需求。数据可视化:输出精美图形和图表,让数据分析变得简单直观。操作便捷:WB一键识别分析、一键统计及画...
Western Blot结果统计分析的实用指南Western Blot(WB)是检测蛋白表达水平的经典技术,但其实验结果的统计分析直接影响结论的可靠性。本文将从软件操作、数据计算到统计学处理,系统梳理WB结果的标准化分析方法。一、软件工具的选择与操作ImageJ:手动分析的首选工具...
Western Blotting(WB)结果分析指南 Western Blotting,即蛋白质印迹法,是一种用于检测和分析特定蛋白质在细胞或组织样本中表达水平的重要技术。以下是对Western Blotting结果进行分析的详细步骤和注意事项: 一、准备工作 确保实验条件一致:在进行Western Blotting时,要确保所有样本的处理、提取、定量以及电泳、转膜等步骤的条...
因此,对于磷酸化蛋白WB检测,我们可以从以下几个方面进行提高。 确定样本中磷酸化蛋白的表达量 通过查阅文献确定某些细胞系的磷酸化蛋白表达情况,如研究癌细胞增殖相关磷酸化蛋白是,常用HeLa细胞(人宫颈癌细胞)、A549细胞(人肺癌细胞)等肿瘤细胞系。还可以通过细胞功能相关性选择表达细胞,比如研究神经信号传导相关的磷酸化...
WB(Western Blotting)实验结果分析指南 一、引言 Western Blotting,即蛋白质印迹法,是一种常用的分子生物学技术,用于检测特定蛋白质在细胞或组织中的表达水平。该技术通过特异性抗体与目标蛋白的结合,以及后续的显色反应,可以直观地展示目标蛋白的存在与否及其相对含量。本文旨在为研究人员提供一套系统的WB实验结果分析方...
裂解细胞:在4℃下持续搅拌30分钟。随后进行超声处理。以探头超声仪为例,设定功率为40W或总功率的40%,进行多次打3秒停3秒的超声处理,每次超声5-10次。超声后,裂解液将变得清澈且不再黏稠。加入Loading缓冲液后进行煮样。注意:跨膜蛋白不宜煮样,直接加入Loading缓冲液。
内参,即内部参照,是WB实验中不可或缺的一部分。它用于校正实验误差,确保上样量和电泳条件的一致性。在分析结果时,首先应关注内参条带,观察其是否清晰、无杂带,以及条带灰度值是否适中。若内参条带异常,可能提示实验操作存在误差,需重新评估实验数据。 🔎 第二步:比较对照组与实验组条带 在WB实验中,对照组(CO...
5. 记录和解释分析结果 将分析得到的量化值记录下来,并根据实验目的和背景知识解释这些结果。例如,可以比较不同处理组之间条带灰度值的差异,从而推断蛋白表达水平的变化。 通过以上步骤,你可以使用ImageJ有效地分析WB实验结果,得到客观、准确的蛋白表达量化数据。
实验在得到漂亮的条带图后,最关键的一步,是进行数据分析。ImageJ是一款功能强大的图像处理软件,可以很好的对WB图片中的条带进行灰度值分析。并且,这款软件是完全免费的。 一、分析步骤 1、打开图片: 图片格式调整 图片对比度调整 蛋白条带选取 选择矩形工具(Rectangle),圈住要分析的条带区域,按数字键“1”。