内参,即内部参照(Internal Control)。它是我们WB实验过程中很重要的一个参考系。 通过内参结果可以判断: 1)实验流程和操作是否正常; 2)实验中各组样本上样量是否一致; 3)目标蛋白的表达水平是否存在差异。 因此内参还被称为上样参照(Loading Control)。 2. 常用内参介绍 GAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶,是糖酵解过...
④其他稀少物种来源研究较少,可以参照文献指导选择内参,或者是选择保守基因高表达的管家基因(GAPDH、Actin和Tubulin最常用的三个内参,它们在几乎所有的哺乳动物细胞中均有高表达,是最常用的胞浆或全细胞内参。) 2、目的蛋白分子量 目标蛋白和内参蛋白大小相当的话,WB 结果无法直接观察,很难进行准确数据的分析。因此要...
一、 内参选择原则 1. 样本种属来源: 2. 目的蛋白分子量: 3. 目的蛋白表达部位: 二、 常用内参展示 三、 Proteintech内参抗体优势 1. 内参种类齐全 2. 超高稀释比 3. 超多文献引用 做过WB实验的同学都知道,除了目的蛋白之外,我们同时还需展示另一个重要蛋白的数据,那便是——内参。 内参,即内部参照(Intern...
(5)目标蛋白细胞内表达部位:不同细胞类型或组织中内参蛋白的表达量可能不同,根据目标蛋白在细胞内的表达部位可选择不同的内参。细胞总蛋白一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 (6)抗体特异性...
GAPDH,Tubulin,Actin是WB实验中最常用的三种上样内参(loading control),因被认为表达水平受环境因素影响较小,在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达或变化很小,所以被称为管家基因(house-keeping genes),是WB实验中校正上样量、检...
在WB实验中，内参蛋白的重要性不言而喻。它是实验流程的基准，用于检测样本处理的均匀性和目标蛋白表达的比较。选择内参需遵循以下原则：样本来源：哺乳动物实验通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B等，稀有物种则依据保守管家基因选择。蛋白分子量：内参应与目的蛋白分子量差异明显，如45kDa目标...
选择内参抗体需要考虑的因素 1.分子大小 内参蛋白分子大小(kDa)的选择非常重要,与目标蛋白相比,内参蛋白应该要足够大或足够小,以便与目标蛋白区分。如果目标蛋白和内参蛋白大小相当的话,WB 结果无法直接观察,很难进行准确数据的分析。 2.线性范围及上样量
WB实验之内选择攻略。WB实验不知道内参蛋白怎么选?👇🏻看这篇就够了! #WB实验 #内参蛋白 #SCI科研 - 小李小李~期刊sci于20240816发布在抖音,已经收获了2个喜欢,来抖音,记录美好生活!
选择WB(Western Blot)的内参,通常需要根据你的实验目的和已拥有的抗体来决定 2楼2023-12-15 09:07 回复 爱吃灬绿豆沙 一般来说,你可以选择一个与你要检测的蛋白没有明显相关性的内源性蛋白质作为内参,以验证你的实验过程和分析结果 3楼2023-12-15 09:07 回复 爱吃灬绿豆沙 以下是一些常见的内参选项...
该抗体单克隆抗体,克隆号为1D7。其抗原为人PCNA蛋白中兼具特异性和保守的一段序列,可用于小鼠、人以及大鼠样本的WB内参。另外,该抗体的效价非常高,WB实验推荐稀释比率为1:1000-1:10,000,甚至有客户报告更高的稀释比率。 该PCNA内参抗体免疫组织化学的效果也很不错,是一款非常适合做免疫组化对细胞骨架进行染色定位...