一、 何为内参? 有一类基因被称为管家基因,其表达水平受环境因素影响较小,而且是在个体各个生长阶段的大多数,或几乎全部组织中持续表达,或变化很小。管家基因表达的蛋白质就是我们WB实验中所说的内参。 二、为何需要内参? 在Western blot实验中,我们通常需要检测不同处理条件下的蛋白质含量变化,但由于实验条件等因...
WB内参,即Western Blot实验中的内部参照(Internal Control),指的是在生物医学领域中,特指哺乳动物细胞中由管家基因编码的蛋白(Housekeeping Proteins)。这些蛋白在各种组织和细胞中的表达相对稳定,因此常被用作检测蛋白表达水平变化时的参照物。 在WB实验中,内参的主要作用包括: 校正样本上的变量:由于不同的样品在蛋白...
选择内参的第一步是确保所选择的内参蛋白适合您的实验。 重点考虑靶标蛋白的亚细胞表达位置,以及是否存在在同一亚细胞位置表达的内参蛋白。例如,如果您已经制备了仅由核蛋白组成的裂解物,用 DNA 结合蛋白作为内参要比细胞骨架蛋白更准确。 使用TBP (D5C9H) XP®Rabbit mA...
对于刚入实验室的热血青铜宝宝,WB可谓处处都是轰炸区,一个不小心,分分钟落地成盒。为了帮助大家快速get变强秘籍,提升吃鸡率,我们在此重磅推出《WB实验全攻略》系列文章,助力各位早日成为实验室MVP,进阶WB无敌战神。 内参的定义 内参即是内部参照(Internal Control),选取相同样本中某个内源表达的蛋白作为参照。对于...
1.内参抗体的功能: (1)检测整个WB流程是否正常 (2)检测基因表达产物是否正确 (3)比较表达产物微量的相对变化 (4)评价各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致 2.内参抗体的选择: (1) 样本种属来源 l哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、NaK、Atpase等。
在Western Blot(WB)实验中,内参(Internal Control)就像一把“标尺”,用于校正实验误差,确保目标蛋白的表达差异真实可靠。无论是上样量的波动、转膜效率的不均,还是抗体反应的偏差,内参都能帮助排除干扰,让实验结果更具说服力。 内参的核心作用: 1.校正上样量:通过内参的均一性,验证各组样本是否等量上样。 2....
双内参:为科研结果加上双保险 在WB 实验中,内参是用于校正样品加载量和检测过程中可能出现的变异性的关键因素。传统的内参,如 Actin 或 Tubulin,因其在细胞中相对稳定的表达水平而被广泛使用。但一个 Actin 可能不灵,特别是在细胞类型、生理状态...
WB内参，即在Western blot实验过程中引入的内部参照标准，它像一把精准的尺子，用于衡量和校正实验过程中的各种误差。内参通常选用在生物体内表达稳定、不易受外界条件影响的蛋白质，如β-actin、Tubulin、GAPDH等。这些蛋白质在大多数组织和细胞中都有恒定表达，因此成为理想的校正工具。例如，在研究某种药物对细胞蛋白质...
wb内参是什么意思 wb内参是内部参照的意思。 内参即内部参照,一般是指由管家基因编码表达的蛋白,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。©2022 Baidu |由 百度智能云 提供计算服务 | 使用百度前必读 | 文库协议 | 网站地图 | 百度营销 ...
在Western Blot中使用内参其实就是在WB过程中另外用内参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显...