一抗尽量选择小鼠或者兔来源的单克隆抗体,还有要注意所用的抗体是否能够识别变性条件下的目标蛋白;二抗一般都是效价很高的,只要室温下杂交1小时就可以了,适当延长也是可以的。另外,要选择灵敏度较高的化学反应底物。 2、WB中抗体的可以重复应用吗 答:抗体工作溶液一般不主张储存反复使用,但是如抗体比较珍贵,可反复使用...
2.背景处理: 适当地处理背景可以提高WB图像的清晰度和对比度。 每一步操作的细节都可能影响到WB实验的结果,所以对每个步骤均应细致入微,严谨操作。 百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商 相关服务: 蛋白质免疫印迹和电转移服务
wb实验注意事项 一、实验前准备 1、实验前,需先检查房间内是否有易燃易爆物品,需确保实验室环境的安全可靠性。 2、要携带安全防护用具,如安全眼镜、橡胶手套、防护口罩等。 3、检查实验台内是否有杂物,所有的设备、仪器应当用镊子精细清理干净。 4、有必要的话,也可以将实验台放置在合适的距离,以免浪费宝贵的试剂...
1、在缓冲液中加入甲醇的目的是促使SDS的游离，并增加膜结合蛋白的数量。然而，过量的甲醇可能导致凝胶收缩，使得大分子在凝胶中沉淀，从而降低转膜效率。对于分子量较大的蛋白质（例如大于60kDa），建议采用低浓度的甲醇或完全不使用甲醇。2、检查电转移效果的方法包括：①利用考马斯亮兰染色技术对电转移后的凝胶进行...
WB注意事项 1.制胶时,长短板下端对齐,以免漏胶,可以先用水进行检漏 2.制胶时,需根据蛋白分子大小配制分离胶,因此需要提前确定蛋白分子大小 3.制备样品时,样品需95 度灭活,maker 不需要 4.上样时,尽量做到快、准、稳,小心样品弥散 5.上样时,如有多余的孔,则加入与样品等量的上样缓冲液 6.跑电泳时,注意...
以下是在进行WB实验过程中需要注意的关键事项。一、实验前的准备1. **试剂与材料**：确保所有试剂和材料均在有效期内，并已按照制造商的说明进行存储。特别关注抗体，它们是WB实验的核心，需要妥善保存并避免反复冻融。2. **样品准备**：根据实验需求，准备适量的样品。确保样品处理过程中无污染，并且已经进行了...
wb实验注意事项 仪器实验技术实验——注意事项 一、实验前准备 1.检查仪器:实验前,仔细检查仪器,确保仪器安装正确高度,仪器参数是否正确调整; 2.准备样品:实验前请准备足够的样品材料,确保实验条件一致; 3.其他准备:准备安全防护用品,如耳塞、护目镜、护手霜等,确保实验安全。 二、实验作业 1.熟悉实验程序:实验...
1、WB 注意事项及常见问题注意事项一、样本收集1. 组织样本原则上要求客户或我们的技术员把组织分切剪碎至研磨管 (根据实验的需要告 知他们取多少组织),并加入适量裂解液和研磨珠,然后放置于-80C保存。具体 详情参照 “组织样本收集注意事项 .doc ”;2. 细胞样品原则上要求客户或我们的技术员不要用胰酶把细胞...
WB实验的注意事项 一、蛋白样品的制备 按组织净重(g):裂解液体积(ml)=1:10的比例加入相应体积的裂解液(加入终浓度为1mM的PMSF、适当浓度的蛋白酶抑制剂和磷酸化酶抑制剂,以避免内源性酶分解蛋白,影响蛋白质的抽提)进行匀浆。 蛋白质的样品制备是westemblotting的第一步,也是关键步骤,要想获得所有蛋白质,应注意...