如果不加SDS,是用tris填平吗 小分子蛋白(10KD)在进行Western Blot(WB)实验时,通常确实使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。SDS是一种表面活性剂,它的作用是使蛋白质变性并赋予蛋白质负电荷,使蛋白质按照大小进行分离。 如果你在电泳过程中不加SDS,蛋白质将不会完全变性,这意味着蛋白质的电泳迁移不仅受到它们大...
我做SDS-PAGE和WB时得到24KDa和14kDa两条较明显的带，把这两条带做质谱分析，结果是同一种蛋白，...
1.2 什么是PAGE PAGE(Polyacrylamide Gel Electrophoresis,聚丙烯酰氨凝胶电泳),如果将SDS变形蛋白质置于电场中,它们的速度不能被很好的控制并向正极移动,因为1.4g SDS结合1g蛋白,而蛋白均带上SDS的负电,此时不能很好的将蛋白根据大小分开,甚至是相同的速度转移到正极。所以我们需要将蛋白质放入一个允许不同大小的蛋白...
考马斯亮蓝染色是染全蛋白,没有特异性,一般只有含量比较多的能看到条带。wb是抗体特异性结合,一抗二抗有放大的作用,灵敏度更高,所以表达量低也能杂出。 所以考染看不到条带并不表明没有表达,可能表达量低。发布于 2023-02-15 17:15・IP 属地江苏 求女主娇软懦弱爱哭,男主大变态,天天欺负女主的小说,有...
一抗兔抗（1：400稀释），二抗羊抗兔（1：4000稀释），AP显色后，出现所有的条带，和SDS-PAGE胶跑...
SDS-PAGE凝胶电泳是一种可以根据蛋白质的分子量分离样本中蛋白的技术,在电荷的影响下分离大分子称为电泳(electrophoresis),在SDS-PAGE中使蛋白质呈线性化的试剂是SDS,使用的凝胶是聚丙烯酰胺(polyacrylamide),因此得名SDS-PAGE。 2.sds-page凝胶电泳原理:
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用摇瓶作少量表达），没有经过纯化，因为我担心WB检测不到His标签的话，纯化的时候能挂到柱子上吗？
最近做SDS-PAGE较多,一般当跑到浓缩胶压成很细条带时,一般都可以继续进行。所用的缓冲液buffer没有多大问题,即使跑到分离胶时条带变宽。如果跑到浓缩胶压成较宽条带,最好停止,换成新配buffer,表明buffer使用时间过长。另外,判断buffer使用时间是否过长的另一个方法,是看buffer灌入槽内,是否有粘稠,如果粘稠,最好...