这种条带的出现通常与凝胶制备或电泳过程中的问题有关。 二、WB电泳微笑条带的原因和解决方法 1. “微笑U”状条带 如果条带呈“微笑U”状,可能是由于凝胶冷却不均一或电泳槽老化导致的。解决方法包括更换电泳槽或重新制备凝胶。 2. “倒U微笑”状条带 如果条带呈“倒...
一、 条带呈“微笑”或“倒微笑”状 二、 目标条带没有信号 三. 图片背景过高,难以分辨条带 四、 膜上出现黑点和黑斑 五、 出现非特异性条带 六、条带中出现整条白色空斑 七、条带中出现白圈 八、 条带拖尾 九、条带变形 十、条带呈哑铃状 十一、最边缘条带弯曲 十二、背景非均一性 十三、其他问题...
除了无信号or信号弱、实际检测条带大小与预期不符、多带和高背景现象外,WB实验时可能还会遇到背景有黑色斑点或污迹(图2)、背景有不均匀的白色斑点或污迹(图3)、微笑条带(图4)和相同的蛋白杂交出现大小不均匀条带(图5)等现象。接下来,我们...
★ 抗体和marker发生了反应 ˙ 在分子量蛋白标准和第一个样品之间增加一个空白条带。 5.目的条带染色过低 / 过高 ★ 分离不彻底 ˙ 改变凝胶比例:分子量大的蛋白用低浓度胶,分子量小的蛋白用高浓度胶。 6.相同的蛋白杂交出现大小不均匀条带 ★ 制备凝胶时凝胶凝固太快,致使泳道中丙烯酰胺的比例不均匀 ˙ 参...
原因:凝胶不充分,电压过高,温度过高,电泳速度过快,电泳槽老化。 ☎️建议:待充分凝胶后再电泳,降低电压,低温电泳,减慢电泳速度,更换电泳槽。 ⭐基本重新制胶没有问题,偶尔出现一次也正常,购买商品化的…
一、条带呈“微笑”或“倒微笑”状 问题条带 原因分析: 1.条带呈"微笑U"状,凝胶冷却不均一,电泳槽老化; 2.条带呈"倒U微笑"状,凝胶左右两头没有凝固好。 解决方法: 1.更换电泳槽; 2.重新制胶 二、目的条带没有信号 问题条带 问题分析:
**WB微笑条带一般为低G+C富含双螺旋区域、疏水结合表面和抗原表位,长度大约为15个氨基酸**^[2]^ 2楼2023-12-23 09:28 回复 绿色天空 Western Blot(简称WB)是指通过分析抗原在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率来确定蛋白质的相对分子量的一种试验方法 3楼2023-12-23 09:28 回复 绿色天空 一般由特异性...
在进行Western Blot(WB)电泳时,有时会出现呈“微笑”或“倒微笑”状的条带,这就是所谓的“WB电泳微笑条带”。这种条带的出现通常与凝胶制备或电泳过程中的问题有关。 二、WB电泳微笑条带的原因和解决方法 “微笑U”状条带 如果条带呈“微笑U”状,可能是由于凝胶冷却不均一或电泳槽老化导致的。解决方法包括...
除了无信号or信号弱、实际检测条带大小与预期不符、多带和高背景现象外,WB实验时可能还会遇到背景有黑色斑点或污迹(图2)、背景有不均匀的白色斑点或污迹(图3)、微笑条带(图4)和相同的蛋白杂交出现大小不均匀条带(图5)等现象。接下...
一、条带呈“微笑”或“倒微笑”状 问题条带 原因分析: 1.条带呈"微笑U"状,凝胶冷却不均一,电泳槽老化; 2.条带呈"倒U微笑"状,凝胶左右两头没有凝固好。 解决方法: 1.更换电泳槽; 2.重新制胶 二、目的条带没有信号 问题条带 问题分析: