三、手把手教你用ImageJ测灰度值 作为免费的图像分析神器,ImageJ在WB定量中几乎不可替代。打开软件后,点击“File→Open”导入图像,选择“Image→Type→8-bit”转换为灰度模式。用矩形选框工具框选目标条带(确保选框宽度覆盖条带但不超过泳道边界),按下“Ctrl+M”测量灰度值,此时会弹出一个包含“Area”
这样就算出来需要加多少蛋白上清和稀释液了。 图10 计算所需上清体积和稀释液体积 以这种方法制备的样品上样体积是一定的,可以统一为5μl、8μl、10μl、15μl等。此方法的优点是不用反复调枪,上样体积均匀一致,缺点是计算复杂,需要再次加入试...
Western blot是显示蛋白丰度相对变化的 半定量方法, 通过分析信号强度,可以确定样本中目标蛋白 的表达量 相对于其它样本(如对照组、模型组)是增加还是减少。将目标蛋白条带发出的信号使用软件 进行分析,计算出目标蛋白的相对定量值,即为WB定量。 今天就把完整的WB定量方法及定量软件具体操作步骤,跟大家分享一下,有需...
首先,我们用WB定量拉直软件打开弯曲的WB图片: 随后沿着弯曲的线划线: 再用鼠标双击Segmented line选项,设置线段的宽度至包含所有条带: 点击菜单栏Edit-Selection-Straighten,倾斜的WB条带立刻被拉直,并保存为新的图片: 最后再保存导出图...
超详细WB实验蛋白浓度定量与上样体积计算Protocol分享 实验目的：本实验旨在测定WB实验中所用蛋白的浓度，以及确定所需的上样体积。实验所需材料和试剂：1. Bradford蛋白浓度定量试剂盒（含标准品）2.微量比色皿 3.安培管 4.高速离心机 5.加热水浴 6.微量移液器和相应的移液管头 实验步骤：1.准备样品和标准品 ...
以这种方法制备的样品上样体积是一定的,可以统一为5ul、8ul、10ul、15ul等。此方法的优点是不用反复调枪,上样体积均匀一致,缺点是计算复杂,需要再次加入试剂。 以上是WB实验蛋白定量和计算上样体积常用的两种方法。整个实验过程,有些可以粗,有些必须细,实验结果的完美呈现,都是在一次次失败中总结出来的,失败并...
以这种方法制备的样品上样体积是一定的,可以统一为5μl、8μl、10μl、15μl等。此方法的优点是不用反复调枪,上样体积均匀一致,缺点是计算复杂,需要再次加入试剂。 以上是WB实验蛋白定量和计算上样体积常用的两种方法。整个实验过程,有些可以粗,有些必须细,实验结果的完美呈现,都是在一次次失败中总结出来的,...
应用:计算细胞数、定量分析DNA电泳、WB条带 ImageJ 英文版 请各位买家付款后超过5分钟没有收到软件的 我们客服的邮件 尽快给您安排发货! 赠送PDF教程 ImageJ这套软件可以自动帮你你计算细胞数,也可以定量分析DNA电泳或是Western blot条带。 软件使用简介 ...
蛋白浓度定量与上样体积计算详细方法和流程。WB实验的成败在每个细节里,最开始的也是最重要的。蛋白定量的方法有很多种,基本上都是“用已知求未知”的方法,在这里主要介绍的是BCA蛋白浓度定量的方法。拿到BCA蛋白定量试剂盒后按照说明书,准备好所 - 嘉嘉搞科研于2024082
是显示蛋白丰度相对变化的半定量方法,通过分析信号强度,可以确定样本中目标蛋白的表达量相对于其它样本(如对照组、模型组)是增加还是减少。将目标蛋白条带发出的信号使用软件进行分析,计算出目标蛋白的相对定量值,即为WB定量。 对WB条带进行定量有两种方法——灰度分析和光密度分析。今天分享用Image J 定量分析 WB 灰...