3. 使用异源病毒的包膜蛋白组装VSV假病毒:构建SARS-CoV-2 S的表达质粒,转染细胞后,全长的S蛋白可表达并锚定在细胞膜上,用以上获得的G*ΔG-VSV侵染细胞后,提供了不含G基因的基因组,表达了除G蛋白之外的VSV的酶和结构蛋白,然后病毒出芽从细胞中释放,即可获得S蛋白包膜的重组假病毒rVSV-SARS-CoV-2 S,具有 ...
生产VSV假病毒的步骤通常包括构建携带报告基因的病毒毒株和表达质粒，然后通过质粒转染细胞和病毒侵染快速获得假病毒。当这些假病毒与含有SARS-CoV-2受体的细胞如Huh-7、Vero细胞共培养时，它们会通过细胞表面的受体附着并进入细胞。进入细胞的假病毒会表达除G蛋白外的所有VSV蛋白，这些结构蛋白会被组装成病...
解释：细胞在转染前感染痘病毒是为了让细胞内表达出T7 RNA聚合酶，以便获得病毒基因组RNA，正链病毒获得的基因组RNA可以直接表达病毒蛋白组装子代病毒，但负链RNA病毒需要辅助质粒（构成病毒的RNA聚合酶核心）将负链基因组转化为正链RNA，才能表达子代病毒蛋白。VSV假病毒制备方法 ...
2022 ・ 119 ・.论著.新型冠状病毒 VSV 假病毒的 构建及其感染能力的初步研究 李星霖 , 陈丹瑛 , 刘永梅 , 邱雅若 , 李国力 , 宋川 , 孔雅娴 , 赵红心 , 赵学森[ 摘要 ] 目的 在二级生物安全实验室条件下 , 通过构建新型冠状病毒 ( 新冠病毒 ) VSV 假病毒 , 研究新冠病毒及其 流行变异株的侵入特性...
专利摘要:一种基于VSV载体的新型冠状病毒核酸诊断假病毒质控品,利用复制缺陷型水泡性口炎病毒载体系统,制备包括且不限于新型冠状病毒核酸序列的假病毒用于核酸检测的标准质控品。还公开了质控品的制备方法,包括:目的靶标基因的PCR扩增;PCR产物的酶切与回收;目的靶标基因与病毒载体的连接;将病毒质粒转化入大肠杆菌进行培...
1.一种基于VSV载体的新型冠状病毒核酸诊断假病毒质控品及其制备方法, 其特征在于: 所述质控品选用改造型水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitisvirus, VSV)作为新型冠状病毒基因的重组病毒载体, 包裹新型冠状病毒核酸检测的目的靶标基因, 可全方位监测2019‑nCoV核酸提取和检测过程。
摘要: 目的 建立一种含有基孔肯雅病毒(CHIKV)包膜蛋白的便于流行病学调查的疱疹性口炎病毒(VSV)假病毒。方法 以缺失VSV G蛋白的VSV病毒做为载体,制备含有CHIKV膜蛋白的VSV-E2E1病毒。结果 该VSV假病毒带有CHIKV膜蛋白,同时带有绿色荧光蛋白(GFP)或荧光素酶;功效性试验显示,VSV-E2E1病毒在CHIKV E2单克隆...
目的建立一种含有基孔肯雅病毒(CHIKV)包膜蛋白的便于流行病学调查的疱疹性口炎病毒(VSV)假病毒.方法以缺失VSV G蛋白的VSV病毒做为载体,制备含有CHIKV膜蛋白的VSV-E2E1病毒.结果该VSV假病毒带有CHIKV膜蛋白,同时带有绿色荧光蛋白(GFP)或荧光素酶;功效性试验显示,VSV-E2E1病毒在CHIKV E2单克隆抗体1:2 000稀...
目的 构建含有H6N2型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)的疱疹口炎病毒(VSV)。 方法 以H6N2亚型禽流感病毒互补脱氧核糖核酸(cDNA)为模板,扩增HA基因,并与pcDNA3.1 + 载体连接;使用VSVΔG*-G病毒感染制备VSVΔG*-HA假病毒,并对其血凝活性进行测定。 结果 成功构建重组表达载体pcDNA3.1HA;HA蛋白表达于293T细胞;荧光显...
目的构建含有H6N2型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)的疱疹口炎病毒(VSV).方法以H6N2亚型禽流感病毒互补脱氧核糖核酸(cDNA)为模板,扩增HA基因,并与pcDNA3.1+载体连接;使用VSVΔG*-G病毒感染制备VSVΔG*-HA假病毒,并对其血凝活性进行测定.结果成功构建重组表达载体pcDNA3.1HA;HA蛋白表达于293T细胞;荧光显微镜证实VSVΔ...