04VSV2G蛋白修饰的GFP逆转录病毒的构建及表达陈瑾君,刘伟,刘德莉,陆峻泓,崔磊,曹谊林(上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室,上海200011)摘要:目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV2G)共转染,使含绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒经超速离心得以浓缩,进一步提高GFP逆转录病毒的细...
刘 伟 , 刘德莉 , 陆峻泓 , 崔 磊 , 曹谊林(上海交通大学 医学院第九人民医院整复外科 上海市组织工程重点实验室 , 上海 200011)摘 要 : 目的 通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白 G基因 (VSV2G)共转染 ,使含绿色荧光蛋白 (GFP)基因的逆转录病毒经超速离心得以浓缩 ,进一步提高 GFP逆转录病毒的细胞感染效率。
用浓缩前后含GFP基因假病毒液分别转染NIH 3T3细胞,GFP阳性表达率可由44.21%升高至79.80%;转染兔软骨细胞和成纤维细胞,猪骨髓基质干细胞和脂肪干细胞后,均可见GFP阳性表达明显增强.结论 逆转录病毒与VSV-G共转染GP2-293包装细胞可以制备出高滴度的假病毒液.浓缩病毒液的高转染率为其在组织工程种子细胞标记方面的广泛...
摘要: 目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组,提高含绿色荧光蛋白(GFP)基因逆转录病毒的感染效率,并使其经受超速离心以达到进一步浓缩.方法应用GFP-RV质粒转染PT67细胞并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因... 查看全部>> ...
目的 通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组,提高含绿色荧光蛋白(GFP)基因逆转录病毒的感染效率,并使其经受超速离心以达到进一步浓缩。方法 应用GFP-RV质粒转染PT67细胞并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因。收集该...
目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组,提高含绿色荧光蛋白(GFP)基因逆转录病毒的感染效率,并使其经受超速离心以达到进一步浓缩.方法应用GFP-RV质粒转染PT67细胞并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因.收集该GP2-293细胞产生的重...
水泡性口炎病毒与Monocyte及MoDC的互作研究 为了探究水泡性口炎病毒( Vesicular stomatitis virus, VSV)与天然宿主免疫细胞的互作关系,实验用M蛋白第51位甲硫氨酸残基缺失后的重组病毒( VSVAM 51-GFP )和第51位... 邹胜利,聂作明,吴祥甫,... - 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 被引量: 0发表: 2016年 ...
21细胞和vero e6细胞均购自美国模式培养物保藏中心; 58.htnv 76 ‑ 118株病毒由本科室保存;表达t7聚合酶的痘病毒vv ‑ t7由武汉病毒所惠赠;vsv ‑ gfp病毒由本科室制备并保存。 59.抗体g2 ‑ 8、3g1和1a8均由本科室制备并保存;抗体vsv g购自英国abcam公司;抗体irdye 680rd goat anti ...
[0039] 图4:感染反式‑互补的VSV*M ΔG病毒的BHK21C l.13细胞中的GFP表达。 Q [0040] 非细胞病变性VSV*M ΔG病毒在BHK21C1.13细胞中反式‑互补,所述病毒在VSV基 Q 质蛋白内携带突变M33A、M51R、V221F和S226R,并用eGFP序列替代了完整的G蛋白编码序列 [18]。用感染复数(MOI)为3的VSV*M Δ...
21细胞和vero e6细胞均购自美国模式培养物保藏中心; 58.htnv 76 ‑ 118株病毒由本科室保存;表达t7聚合酶的痘病毒vv ‑ t7由武汉病毒所惠赠;vsv ‑ gfp病毒由本科室制备并保存。 59.抗体g2 ‑ 8、3g1和1a8均由本科室制备并保存;抗体vsv g购自英国abcam公司;抗体irdye 680rd goat anti ...