鉴定融合蛋白的表达.结果 PCR扩增获得了h VEGFA基因片段,经测序证实与Gen Bank公布的序列一致,重组的质粒载体经过PCR,酶切鉴定,证明重组质粒中已成功的插入了h VEGFA基因片段.成功构建了该蛋白的原核表达载体p GEX-KG-h VEGFA.结论融合蛋白在IPTG终浓度为0.5 mmol/L,25℃条件下诱导表达,并获得纯化融合蛋白.采用...
融合蛋白亲和纯化目的 克隆人VEGFA基因,与原核载体融合表达,纯化及其鉴定,并将其应用于肿瘤血管生长研究过程中.方法 采用PCR方法扩增人VEGFA序列,将其克隆入pGEX-KG原核载体,获得pGEX-KG-hVEGFA重组质粒.将该质粒转化入E.coli菌株BL21 (DE3),经IPTG诱导其表达,以GSTrap亲和层析柱纯化融合蛋白,采用SDS-PAGE电泳,...
方法鉴定融合蛋白的表达.结果 PCR 扩增获得了 hVEGFA 基因片段,经测序证实与 GenBank 公布的序列一致,重组的质粒载体经过 PCR、酶切鉴定,证明重组质粒中已成功的插入了 hVEGFA 基因片段.成功构建了该 蛋白的原核表达载体 pGEX-KG-hVEGFA.结论 融合蛋白在 IPTG 终浓度为 0.5 mmol/L、25℃条件下诱导表达,并...
人血管内皮生长因子A(VEGFA)的原核载体构建、蛋白表达及鉴定