HPLC-UV法利用物质对特定波长紫外光的吸收特性 。该方法基于朗伯-比尔定律进行定量分析 (A = εcl,A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,c为物质浓度,l为光程长度,通过测定吸光度计算物质浓度 )。流动相的组成和比例对HPLC-UV分离效果有决定作用 。选择合适的固定相是HPLC-UV分析的关键步骤 。不同类型的固定相对不同物
HPLC-UV是高效液相色谱-紫外(High-Performance Liquid Chromatography-Ultraviolet)的简称。 高效液相色谱(HPLC)是一种用于基于大小和表面电荷等性质分离分子的技术。该方法通常使用50~350巴的压力使液态流动相通过包含固态固定相的色谱柱。色谱柱包含吸附材料,通常是颗粒状硅胶或聚合物,构成固定相。流动相由加压的液态溶剂...
1. 在使用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定化合物含量时,化合物的化学稳定性是基本要求,确保在色谱分析过程中不会发生降解或反应,从而保证分析结果的准确性。2. 化合物的分子结构应当具有一定的对称性,这有助于提高色谱柱中化合物的扩散系数,使得分离更为均匀,便于准确测定含量。3. 化合物...
由于芍药甙在紫外区有吸收,通过选择该物质的最大吸收波长,以获得最大的灵敏度和抗干扰能力,选择合适的洗脱剂,以测定柱洗脱液在流动池中吸收紫外光的大小来确定其含量。3.试剂 3.1 重蒸水 3.2 甲醇(色谱纯) 3.3 甲醇(分析纯)3.4 芍药苷(paeoniflorin)标准品(C23H28O11)4.仪器 4.1 高...
方法二、3个不同浓度,每个浓度制备3份供试品,用9个测定结果进行评价,建议高、中、低浓度对照品加入量与所取供试品中待测定成分量之比控制在1.5 : 1,1 : 1,0.5 : 1左右(建议高中低浓度)。(样品批次变动较大,优选方法) 应报告供试品取样量、供试品取样量、含有...
HPLC与UV的具体区别如下 1.HPLC是一种色谱分析技术,它通过将混合物中的各个组分分离并通过柱层析的方法进行纯化。 在HPLC分析中,可以通过选择合适的固定相和流动相来分离不同的化合物。 它可以用于定量分析,通过比较样品中特定组分与已知标准品的峰面积来确定该组分的浓度。 2.UV检测是一种基于...
采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)进行含量测定对化合物结构的要求如下:化合物必须具有一定的化学稳定性,以保证在色谱分离过程中不发生降解或反应。化合物的分子结构应具有足够的对称性,以使其在色谱柱中的运动具有较好的规律性,有利于分离和测定。化合物的紫外吸收光谱应具有较好的特征性,以...
HPLC-UV的使用及注意事项 高效液相色谱仪使用说明 HPLC-UV(JASCO)使用程序 1、相色谱仪开启程序: 1)、打开电脑,进入系统workstation version 4.0。 2)、打开反控开关分别打开检测器、泵、柱温箱、进样器的开关更换流动相用注射器抽气. 3)、打开borwin工作站打开工具栏中control edit run control method建立方法...
什么是HPLC-UV? 除了光谱学之外,色谱法可能是现代实验室中使用的主要仪器分析技术之一。有许多不同类型的色谱法,但它们都遵循相同的基本原理。实验室中使用的色谱法的主要形式之一是HPLC,而HPLC通常以UV检测器的形式与光谱相结合,从而产生了强大的HPLC-UV技术。
HPLC,即高效液相色谱法,是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。GC,即气相色谱,可分为气固色谱和气液色谱。气固