对于裂解细胞,通常约0.1%的曲拉通-100水溶液就足够了,甚至高达0.5%的浓度通常也不会损害大多数分离的酶。在X-100的存在下,许多酶仍然保持活性。产品参数:CAS:9002-93-1 英文名称:Triton x-100 别名:辛基苯基聚氧乙烯醚;聚乙二醇对异辛基苯基醚;异辛基苯基聚氧乙烯醚;乳化剂OP-10 分子式:C34H62O...
取Triton X-100 Lysis Buffer室温溶解混匀,加入PMSF,使PMSF终浓度为1mM。 低速离心悬浮细胞,弃上清,收集沉淀。 用手指轻弹细胞,使其松散,按照6孔板每孔细胞加入150~250μL含有PMSF的裂解液的比例,加入Triton X-100 Lysis Buffer;通常6孔板每孔细胞加入150μL裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解...
在细胞研究中,0.1%的Triton X-100浓度被广泛用于提高细胞膜的通透性,从而使得荧光染料等物质能够更有效地进入细胞内部。这种处理方法特别适用于细胞骨架染色,其中荧光染料需要与F-actin进行特异性结合。在进行染色之前,通过短暂的Triton X-100处理,可以显著提高染色效果。Triton X-100是一种非离子型表面...
加入PMSF至终浓度为100μg/ml(0.87ml裂解液加入1.74mg/ml PMSF50μl).(一般实际用的比较多的其实是RIPA裂解配方:50 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM 本听深布喜子NaCl、1 mM PMSF、1 mM EDTA、1% Triton x-100、1%脱氧胆酸钠、0.1% SDS)2:裂解细胞的步骤:常规...
TritonX-100通过破坏脂质双分子层,溶解细胞质和细胞膜,破坏大部分蛋白质抗原的微弱结合键。该裂解液在0.1%-1%浓度时即可满足几乎所有细胞溶解需求,并且可以补充等离子浓度的盐,使pH接近中性。使用此裂解液提取的蛋白质样品可以通过BCA蛋白浓度测定试剂盒进行浓度测定。然而,由于含有较高浓度的去垢剂,...
Triton X-100 法提取RNA:Triton X-100 是一种非离子型的表面活性剂,用来裂解细胞时,0.1%的浓度就足够了。结合加热裂解、氯仿抽提、无水乙醇沉淀等方法,可以用来提取细菌中的RNA,而且提取出来的RNA 不含有23S 和16S rRNA,更有利于后续的分子实验研究。具体步骤如下: ①8,000 r/min,4 ℃,5 min 收集菌体细胞...
网上看到DNA提取用的TritonX-100是5%的(维基百科),所以不想破坏核膜的话得浓度再低点。免疫组化一般用0.5%够了,但免疫组化只是令抗体能够通过细胞膜就行,说到要裂解你还得再研究一下赫赫。
作用:具亲水端和疏水端,可将膜蛋白从细胞膜上解离下来,达到提取膜蛋白的作用。常用的非离子性去垢剂。1%的tritonX-100常用于漂洗组织标本,0.3%的tritonX-100则常用于稀释血清,配置BSA等。常用作气象色谱固定液,也用作非离子表面活性剂。对人体有害,请注意适当防护。
1% Triton X-100的细胞裂解液是一种常用的快速裂解液,适用于常规Western、IP等实验。裂解液的主要成分包括50mM Tris (pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.1% SDS。使用这种裂解液,可以得到可用于测定蛋白浓度的样品,通常采用BCA法。由于含有较高浓度的去垢剂,不宜采用Bradford法进行蛋白浓度测定。