免疫细胞化学中Triton X-100常用浓度为1%和0.3%,其中1%的Triton X-100常用于漂洗组织标本,0.3%的Triton X-100则常用于稀释血清,0.1%的Triton X-100常用于LAMP(环介导等温扩增),配制BSA等。但通常是先配制成30%的Triton X-100储备液,临用时稀释至所需浓度。 ”
1、在免疫组织化学(厚切片)和免疫细胞化学中,Triton X-100被用来做细胞破膜剂/细胞通透剂,即在细胞膜上打孔,可以溶解细胞膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆内,这样抗体就能进入内与相关的抗原结合了。 2、Triton X-100一般在阻断缓冲液中或稀释缓冲液中使用,基本不用做洗液。使用浓度0.2%。较厚的...
封闭液:将血清配置于0.1% TritonX-100中,至其终浓度为6% serum(驴血清);or用1×PBS配置3% BSA 封闭液黑色湿盒室温封闭1-2 h 5. 一抗孵育 抗体稀释液:0.1% Tween-20 配置3% 驴血清 按照经验(1:200)稀释抗体;4℃ 湿盒孵育过夜 6. 二抗孵育 1) 吸去一抗,1×PBS清洗,5 min×3 2) 使用抗体稀释液...
TritonX-100作为免疫荧光染色最为常用的透膜剂,其实质是一种非离子型表面活性剂,能够溶解脂质,增强细胞膜的通透性,便于抗体进入细胞内。 如果需检测的目的蛋白属于胞内蛋白或者抗原抗体结合位点位于胞内的跨膜蛋白,抗体孵育前需进行透膜处理。 TritonX-100浓度和透膜时间并非越大或越长越好,时间过短或浓度过低,会造...
T riton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚) 免疫细胞化学中,Triton X-100常用浓度为1%和0.3%,但通常是先配制成30%的Triton X-100储备液,临用时稀释至所需浓度。 30% Triton X-100的配制: 试剂:Triton X-100 28.2ml 0.1mol/L PBS(pH7.3)或0.05mol/l TBS(pH7.4) 72.8ml 配制方法:取Triton X-100及PBS(或...
4、PBS清洗切片,然后加入适量0.1% TritonX-100,室温破膜10 min(如果膜表达的蛋白/抗原则不需要进行破膜),后用PBS洗净,10%山羊血清室温孵育20 min(封闭血清应与荧光二抗来源一致); 5、甩去血清,滴加一抗工作液,4 ℃过夜; 6、次日...
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释，再加一点TritonX100效果好。 培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了，用培养液没什么意义，只要保证其pH等条件适合就好了。 抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下，有很多protocol。
细胞免疫荧光tritonx-100用什么稀释?网友 1 最佳答案 回答者:网友 PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点Trit轮财onX100效果好。 培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培据一减燃军十告罗息接持养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。 抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,...
Triton X-100是一种不变性的相对温和的去垢剂,可溶解脂质,以增加细胞膜对抗体和其它探针的通透性,所以常用于细胞的裂解以提取蛋白和细胞器或细胞的通透用于抗体或探针的标记,也常用于免疫印迹(Immunoblot, 即Western blot或WB)、免疫荧光(Immunofluorescence, IF)、免疫组化(Immunohistochemistry, IHC)和免疫细胞化学(...
看你要染的目的蛋白位于细胞的位置了 如果位于细胞内 那么加Triton-100是必须的 因为Triton-100的作用是通透细胞膜 这样一抗才能与位于胞内的蛋白发生结合 如果目的蛋白位于细胞膜表面 那么加Triton-100的意义就不是很大