Tricine-SDS-PAGE具体步骤 有篇Nature的protocal,我们试验室的Tricine-SDS-PAGE就是参照其做的。 Tricine sds page.pdf (209.29k) Tricine-sds-page 一.试剂及缓冲液 AB-3 浓缩胶: 9.6g丙烯酰胺0.3g甲叉双丙烯酰胺溶于20ml水.(49.5%T,3%Cmixture) AB-6 分离胶: 9.3g丙烯酰胺0.6g甲叉双丙烯酰胺溶于20ml...
二、样品的制备 进行步骤7或步骤8。 7.制备蛋白溶液。 a.将蛋白质溶液和 2XSDS-PAGE 上样缓冲液以 I:1 混合。在理想情况下,SDS 和多肽结合的比例是每克多肽 1.4 gSDS,但为了保证有足够量的 SDS,蛋白质的终浓度不应高于 10jug/julD 实验提示:将整个样品都上样时,切记样品的体积(也就是蛋白质溶液和上样...
二、实验步骤 1、不同组成的丙烯酰胺溶液的配制 Tricine-SDS-PAGE的凝胶由不同分子组成的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺混合液聚合而成。其中浓缩胶由3C丙烯酰胺储存液配成4%的丙烯酰胺溶液聚合而成,夹层胶由3C丙烯酰胺储存液配成10%的丙烯酰胺溶液聚合而成,致密胶由5C丙烯酰胺储存液或6C丙烯酰胺储存液配成16.5%的丙烯...
Tricine-SDS PAGE阳极电泳液实验步骤: 1. RNA的提取; 2. 反转录合成cDNA; 3. PCR扩增; 4. 产物的电泳和结果的测定。 Tricine-SDS PAGE阳极电泳液送样要求: 1、组织样本:-20℃或-80℃低温冰箱中保存,液氮或者干冰运输;市内或短途运输可冰袋运输。若提供的材料为新鲜组织、血液细胞等生物材料,请提供...
2、在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。 3、在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不能太快。 4、丙烯酰胺具有神经毒性,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。 5、Tris—Tricine—SDS-PAGE凝胶制备试剂盒仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。©...
Tricine-SDS PAGE上样液实验步骤: 1. RNA的提取; 2.反转录合成cDNA; 3. PCR扩增; 4.产物的电泳和结果的测定。 Tricine-SDS PAGE上样液送样要求: 1、组织样本:-20℃或-80℃低温冰箱中保存,液氮或者干冰运输;市内或短途运输可冰袋运输。若提供的材料为新鲜组织、血液细胞等生物材料,请提供足够提取2ug以上基...
在进行Tricine-SDS-PAGE电泳实验时，阳极缓冲液与阴极缓冲液的配置是关键步骤之一。阳极缓冲液的配置方法是：首先将121.14克Tris溶解在400毫升的蒸馏水中，然后使用1.0摩尔/升的盐酸（HCl）将溶液pH值调整至8.9，最后将总体积定容至500毫升。阴极缓冲液的配置则涉及更复杂的成分：将60.55克Tris、89....
Tricine-SDS-PAGE 配胶液250mL价格实验步骤: 1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响链的合成,也不影响PCR反应。 2.匀浆后加之前样品可以在-...
聚丙烯酰胺凝胶不同浓度可以分离不同大小的蛋白质,比如:10%的凝胶分离范围为1-100kDa(图2a),16%的凝胶分离范围为1-70kDa(图2b),而Tricine-SDS-page可提供更大的分离范围,特别适于小蛋白质和多肽的分离。通过使用16% T,6% C凝胶(图2C)和添加6 M尿素进一步提高小分子蛋白的分离能力(图2d)。 通常采用考马斯...
介绍:常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子物质的,而对了相对分子量小的,尤其是10kD以下的蛋白分辨率极低。本人用Tris- SDS-PAGE做一个20KD以下的蛋白结果不是很理想,而且重现性差,因为在这种不连续的缓冲系统中,低分子量的常常堆积在浓缩胶中。而Tricine-SDS-PAGE 可以很好的分离30KD以下的蛋白,而且本人还...