常规 SDS-PAGE 凝胶电泳适用于分离大分子蛋白，对于小分子量的蛋白或多肽，分辨率大大降低。Tricine-SDS-PAGE电泳能够较好的分离10KD以下的蛋白或多肽，是电泳法分离多肽的主要方法，30T一般可以配制30～35块胶，具体配制的量应根据器具大小决定。电泳分离后可直接考马斯亮蓝染色、银染等。产品组成：操作步骤(仅供参考...
AB-6分离胶: 9.3g丙烯酰胺0.6g甲叉双丙烯酰胺溶于20ml水. (49.5%T,6%Cmixture) 凝胶缓冲液: 1X 2.422gTris 0.02gSDS溶于20ml水,HCL调节pH=8.45. 样品缓冲液:1X 12%SDS,6%mercaptoethanol,30%glycerol,0.05%coomassie blue G-250,150mMTris\HCL(pH=7.0) 阴极缓冲液: 1X 1...
1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。 2、加入10%APS和TEMED,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。 3、将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面(对于1 mm的mini-gel,夹层胶溶液加约1ml), 然后在夹层胶溶液上轻轻覆盖一层水层,使凝胶表面保持平整。
5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制(10 ml) (本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明) 组分:Tris-HCl pH6.8(60 mM);SDS (2%);溴酚兰(0.1%);甘油(25%);β-巯基乙醇(14.4 mM) 配制过程: 1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 0.6 ml。我来回答 提交回答 重置等你来答 1,2,3,4情-四甲基-1,3-环丁...
Tricine SDS-PAGE Protocol(两层法) 一、缓冲液的配置: 1.正极缓冲液anode buffer(1X): 0.2MTris(pH 8.9):12.114g加H20定容至500ml,4℃保存。 2.负极缓冲液cathode buffer (1X): 0.1MTris +0.1MTricine+0.1%SDS不用调pH: 6.057gTris+8.96gTricine+0.5gSDS加H20定容至500ml,4℃保存。 3.凝胶缓冲液...
TRICINE-SDS-PAGE凝胶配制试剂盒是目前电泳法变性分离多肽的主要方法,适用于低分子量蛋白(2.5-40 kD)蛋白的分离。此试剂盒可以制备20或50块0.75 mm×14 cm×14 cm胶。对于大于5 kD的蛋白,无需制备隔离胶,双层胶足以分离。对于小于5 kDa的蛋白,需要制备3层胶才能较好的分离。
Schagger 等改用Tricine-SDS-PAGE系统后,对小分子肽的分辨率明显提高。利用16.5%凝胶浓度、11 %甘油,按"小孔胶+夹层胶+浓缩胶”模式制作不连续的梯度胶,分析昆虫细胞的表达产物,可见小于 14kDa 的几个小分子成分,并呈现清晰的3-4条带,而且还能分离2-3kDa的肽段。利用"6C +U”配方配制的凝胶能分离小至1kDa...
材料与仪器 蛋白质溶液 团粒状细胞蛋白 4X浓缩胶缓冲 4X分离胶缓冲 10X电泳缓冲液 2XSDS-PAGE上样缓冲液 正丁醇 甲醇 SDS储存液 离心机 电泳装置 凝胶上样吸头 玻璃板 加热器 步骤 一、灌制平板胶 1.清洗玻璃板。 …
产品名称:Tricine-SDS-PAGE凝胶配制试剂盒说明书 规格:30T 分类:蛋白电泳 储存条件:4℃,避光,6个月 用途:分离分子量在1KD-10 kD的蛋白及多肽,是电泳法变性分离多肽的主要方法 注意事项:主要由Acr-Bis、Tris-HCl、甘油等、APS、TEMED等组成。 使用方法: ...