维持和免疫抑制功能,并进而影响 Treg 细胞的基因表达、代谢、粘附和迁移以控制机体的免疫稳态和平衡;在本次实验中,运用荧光染料 (如 CellTrace Violet、CFSE 等) 标记 T 细胞,通过流式细胞术来追踪 Treg 细胞的活化增殖及其体外免疫抑制活性。
依据活化状态,Treg细胞可以分为CD44loCD62Lhi静息状态的Treg细胞(简称cTreg,高表达归巢受体CD62L以及趋化因子受体CCR7,主要存在于二级淋巴器官),和CD44hiCD62Llo活化状态的效应Treg细胞(简称eTreg,细胞会下调表达CD62L和CCR7,上调表达活化相关分子如CD44、ICOS、KLRG1、CTLA4、CD69 等,主要定居于非淋巴器官组织中,...
人外周血Treg（6色）检测Panel Design&样本管设置：流式抗体信息：图3.人外周血Treg（6色）检测结果如上图所示，根据CD45+和SSC圈出淋巴细胞群，去除粘连体之后，根据CD3+圈出T淋巴细胞群，再根据CD4+CD8-圈出CD4+T淋巴细胞群，最后通过CD25+CD127-/low确定Treg细胞群。注意事项：1.传统的通过检测Foxp3鉴定Tr...
本文将重点介绍Treg细胞流式标记的原理、方法和应用。 一、Treg细胞的流式标记原理 Treg细胞主要表达特定的表面标记物,如CD4、CD25和FOXP3等,在流式细胞仪中可以利用这些标记物进行细胞的鉴定和分析。CD4是T细胞的标志物,CD25是Treg细胞特异性标记物,而FOXP3则是Treg细胞的特征性转录因子。通过检测这些标记物的表达...
Treg 细胞是指调节性 T 细胞(Regulatory T cells),是一类产生于胸腺,控制体内自身免疫反应性的 CD4+ T 细胞亚群,是维持机体免疫耐受的重要因素之一。 功能 Treg 细胞具有免疫抑制性,对 T 细胞及其他免疫细胞的活化增殖具有显著的负调控作用,能够维持免疫耐受,对抗不良免疫反应,维持机体免疫平衡。
FOXP3是Treg细胞关键的转录因子,它是Treg细胞功能的关键分子,是Treg细胞实现免疫调节作用的重要媒介。CTLA-4是Treg细胞表面的共刺激分子,它能够竞争性地结合CD28,抑制T细胞的活化。 流式细胞术是目前常用的Treg细胞检测方法之一。流式细胞术基于细胞表面标志物的表达水平和细胞内分子的表达情况对细胞进行分析和鉴定。
《Treg—被肿瘤绑架的叛徒》介绍了CD4+ T细胞以及Treg细胞的分类和功能;《Treg细胞的分选方法》、《Treg细胞的体外诱导分化》提供了Treg细胞的制备策略;《Treg表型鉴定:RT-PCR & 流式检测Foxp3表达量》《Treg的功能鉴定:ELISA测定IL-10分泌量》《Treg的功能...
(一) 富集Treg 流式细胞技术可以富集Treg细胞,但常用磁珠富集法,不使用流式富集。因为Treg细胞在T细胞中的比例只有10%左右,如果直接进行流式的富集分选,将会增加上机时长,从2小时延长到4-5小时,对细胞状态有不良影响。 (二) 分选 流式细胞技术可以得到高纯度的Treg。使用抗CD4-FITC抗体、抗CD25-PE抗体和抗CD12...
01 Treg细胞概述 天然CD4+ CD25+ 调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一类具有免疫抑制作用的T细胞,约占外周血单个核细胞(PBMC)2%～5%,约占外周CD4+T细胞的5～10%。该类细胞以“主动”的方式参与免疫应答/…
把处理好的细胞放入流式细胞仪,设置好参数,准备进入“演出”阶段。流式细胞仪就像一个高科技的舞台,能够快速识别和分析细胞,就像评委在看一场激烈的选秀比赛。 3.2数据分析 最后,咱们得分析数据。流式细胞仪会给你一堆数据,别害怕,像是在看一份报告。你需要关注那些被标记的Treg细胞,看看它们的比例和状态。这...