维持和免疫抑制功能,并进而影响 Treg 细胞的基因表达、代谢、粘附和迁移以控制机体的免疫稳态和平衡;在本次实验中,运用荧光染料 (如 CellTrace Violet、CFSE 等) 标记 T 细胞,通过流式细胞术来追踪 Treg 细胞的活化增殖及其体外免疫抑制活性。
10. 加入300μl 1X FACS Buffer重悬细胞,200目滤网过滤细胞,收集细胞悬液,冰上放置,待上机检测; 三、结果分析 1. Treg细胞的亚群分类 (依据来源分类) ① 胸腺来源的 tTreg:CD4+CD8-Foxp3+GFP+Nrp-1+Helios+ ② 外周诱导形成的 pTreg:CD4+CD8-Foxp3+GFP+Nrp-1-Helios- 2. Treg 细胞的亚群分类 (依...
流式细胞术（FACS）是检测Treg细胞的主要方法之一，其步骤如下：样本准备：从外周血、淋巴结或其他组织中分离单核细胞，使用酶或机械方法进行细胞分离。细胞染色：使用荧光标记的抗体对细胞进行染色。常用的标记物包括CD4、CD25、FoxP3和CD127。通常，CD4+CD25+FoxP3+细胞被定义为Treg细胞。流式细胞仪分析：将染色后...
流式细胞实验检测Treg细胞主要通过标记CD4、CD25、Foxp3和CD127等关键指标来识别。1. CD3和CD4表达量较高,适合作为基础标记。2. Foxp3和CD127只需选择一个,Foxp3是核内因子,检测时需要固定破膜,而CD127是细胞表面Marker,不需要固定破膜。3. 小鼠Treg的标记是CD4+CD25+Foxp3+,而人Treg通常通过CD4+CD25+CD127...
《Treg—被肿瘤绑架的叛徒》介绍了CD4+ T细胞以及Treg细胞的分类和功能;《Treg细胞的分选方法》、《Treg细胞的体外诱导分化》提供了Treg细胞的制备策略;《Treg表型鉴定:RT-PCR & 流式检测Foxp3表达量》《Treg的功能鉴定:ELISA测定IL-10分泌量》《Treg的功能...
1表型鉴定:大家知道,经典的Treg细胞标志是CD4+CD25+Foxp3+T[1]。Foxp3的表达是Treg细胞身份的标志,采用RT-PCR技术和流式细胞术,可以鉴定Foxp3基因和蛋白的表达量。 2功能鉴定:肿瘤微环境中的Treg细胞,通过抑制T淋巴细胞的增殖和活化,从而抑制抗肿瘤免疫...
下面是一般的Th17和Treg流式检测步骤：样本准备：收集合适的样本，如血液、淋巴结或外周组织等。根据实验需求，可以进行前处理步骤，如红细胞溶解、组织细胞分离等。细胞表面标记：使用特定的抗体标记细胞表面标志物，以鉴定和区分不同的细胞群。对于Th17和Treg细胞，常用的标志物包括CD4（T细胞标志物）、CD25（Treg标志物...
2、流式检测只选CD4+CD25+或者CD4+FOXP3,会有多大区别? 我们设计了两个Panel(Human&Mouse),分别上机检测,看看结果差异有多少 实验结果对比如下 那么你认为CD25或者FOXP3可以减少不加吗? 3、Treg流式检测,对照设置 4、为何我的CD25染色老不稳定? 因为CD25低表达,又是连续性,还容易上演酶后消失术,所以必须用亮...
3.FOX和CD127只需选择一个即可,Foxp3为核内因子,检测时需要固定破膜(E-CK-A108);CD127是细胞表面Marker,则不需要固定破膜。 04 Treg细胞检测案例 小鼠脾脏Treg(3色)检测 Panel Design&样本管设置: 流式抗体信息: 图2.小鼠脾脏Treg(3色)检测结果 ...
Treg细胞就是调节性T细胞(regulatory T cells),是免疫系统中的基本细胞,是Sakaguchi等人[1]于… 小酷-华美生物 【流式学习】Treg细胞常用的分子标记与检测方案,你想了解的都在这里! 01 Treg细胞概述天然CD4+ CD25+ 调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一类具有免疫抑制作用的T细胞,约占外周血单个核细胞(PBMC)...