1994 年Kim 建立的TRAP 法,其主要原理如下:首先合成一个18nt 的TS 做上游引物,端粒酶结合TS 末端的GTT 并合成AGGGTTAG,然后每经过一次转位合成一个ggttag 的6 碱基重复序列,端粒酶灭活后,加入CX 做下游引物,经过多次变性-退火-延伸,扩增端粒酶延伸产物。 我公司提供的PCR端粒酶活性检测试剂盒基于同样的的原理,利用银染技
6、使用凝胶分析软件进行结果分析 实验方法的说明 1 端粒酶的提取: 端粒酶本身有RNA 和酶功能基团,极其容易被降解、失活。因此,应该按提取细胞总RNA 的要求,尽量在低温条件下,快速操作。简化不必要的反复洗涤程序,
9. 端粒酶活性不高:改善端粒酶反应条件,适当增加端粒酶反应时间,适当增加PCR 循环数(但要避免达到平台效应,使非特异性扩增大量出现),避免buffer A 的恶化,尽量减少端粒酶样品反复冻融。实验操作的指导原则是快速,低温。 质量检测报告 产品名称:TRAP-银染法端粒酶活性检测试剂盒(TRAP-Silver Staining Telomerase DetectionK...
1994 年Kim 建立的TRAP 法,其主要原理如下:首先合成一个18nt 的TS 做上游引物,端粒酶结合TS 末端的GTT 并合成AGGGTTAG,然后每经过一次转位合成一个ggttag 的6 碱基重复序列,端粒酶灭活后,加入CX 做下游引物,经过多次变性-退火-延伸,扩增端粒酶延伸产物。 我公司提供的PCR端粒酶活性检测试剂盒基于同样的的原理,利用...
TRAP法端粒酶活性检测实验操作方法及疑难解答(13)|端粒酶Kim应当不会预测到,他在1994年发明的TRAP会那么受欢迎,被一代又一代的研究者奉为端粒酶 活性检测首选方法。不过,TRAP法虽然灵敏度高,却同样存在瑕疵。下面为大家介绍的是根据TRAP法适当改良的研究专