TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)是一种在小分子药物筛选中常用的技术, 其原理基于时间分辨荧光和荧光共振能量转移(FRET)的结合,具体如下: 时间分辨荧光。 传统荧光容易受到样品背景荧光干扰,因为背景荧光寿命短,而时间分辨荧光采用镧系元素(如铕Eu³⁺、铽Tb³⁺ 等)标记生物分子。这些镧系元素螯合物被激发...
总结来说,PROTAC技术通过其独特的作用机制,为多种疾病的治疗提供了新的可能,尤其是在克服传统药物的局限性方面展现出优势。 图三TR-FRET技术用于筛选PROTAC分子技术原理模型 如所示,Tag1 与 Tag2 之间的相互作用是通过使用Eu标记的抗 Tag1 抗体(TR-FRET 供体)和 Accepter 标记的抗 Tag2 抗体(TR-FRET受体)检测...
TR-FRET技术的应用原理在各大试剂盒制造商中保持高度一致性。无论是通过共价结合将供体和受体与分子互作伙伴相连,还是利用特异性抗体分别标记两个靶标(或标签),其基本原理都是一致的。当供体被激发时,若目标分子间距离足够近,能量将有效传递给受体,从而引发荧光共振能量转移并产生发射。输出信号的强度与发生的分子结合...
第一步:细胞处理,需5分钟或过夜,激动剂/抑制剂处理细胞;第二步:细胞裂解,15~60分钟;第三步:检测,加检测抗体对,孵育1小时或过夜,酶标仪检测。 THUNDER磷酸化/总蛋白检测原理图 THUNDER磷酸化ERK部分检测数据展示 名称 六、THUNDERTMTR-FRET cAMP检测试剂盒 THUNDER cAMP试剂盒采用竞争法检测,Eu通过链霉亲和素和...
CD40是一种主要表达在B细胞、单核细胞、巨噬细胞和某些树突细胞表面的共刺激分子。它通过与CD40配体(CD40L,也称为CD154)结合,发挥其生物学功能,主要参与免疫应答的调节,特别是在T细胞依赖的B细胞激活和抗体产生过程中。 CD40-CD40L的相互作用是免疫系统中一个关键的信号通路,它促进B细胞的增殖、分化和存活,同时增强...
基本原理 荧光共振能量转移(FRET)是指一种荧光标记分子采用荧光共振原理,通过相互作用,在能量转移过程中从一个荧光分子(供体D)向另一个荧光分子(受体A)传递能量。能量转移的发生在一定距离(通常小于10nm)内,该距离也被称为FRET距离。在FRET的过程中,FRET现象被一系列因素所影响,如荧光分子的数量、荧光分子的吸收和...
HTRF 延迟检测原理 FRET技术是当供体荧光分子的发射光谱和受体荧光分子的激发光谱重叠的时候,可以将供体分子的能量共振转移到受体分子上的技术。 与其它免疫检测技术(以ELISA为代表)相比较,TR-FRET的特点: 免洗,操作简便 数据稳定性好 数据背景值低 易于自动化操作 ...
基本原理：HTRF(均相时间分辨荧光)是用来检测均相体系中待测物的一种最常用的方法，是用来研究药物靶标的理想的平台。这种技术结合了荧光共振能量转移(FRET) 和时间分辨技术(TR)。在TR-FRET实验中，当供体和受体相离很近时，在供体和受体之间会有荧光共振能量转移而产生信号。采用双波长检测能够显著减小缓冲液和培养...
测定原理 Assay principle Biorbyt磷酸化和总蛋白测定法是基于均相(无需清洗)TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)技术的夹心免疫测定法。一种抗体用供体荧光团(一种铕螯合物)标记,第二种抗体用受体荧光团(一种小分子染料)标记,前者的发射光谱与后者的激发光谱重叠。抗体与靶蛋白的结合使供体和受体的荧光团紧密接近,当...