本研究主要利用Himar1转座诱变体系构建OKB105菌株的突变体文库,其中,pMarA是专为随机诱变芽孢杆菌而设计的穿梭载体,携带有TnYLB-1转座子、高温敏感的芽孢杆菌复制子以及依赖σ A 启动子引导的Himar1转座酶。50℃高温诱导条件下,pMarA质粒无法复制,在Hi- mar1转座酶的催化作用下,TnYLB-1转座子可以插入到枯草芽孢...
枯草芽胞杆菌9407(B9407)是1株对苹果轮纹病具有显著防效的生防菌株.为深入研究该菌株防病的分子机制,利用携带转座子TnYLB-1的温敏型质粒pMarA构建了B9407的突变体库.通过电击转化将pMarA转化至B9407,经过30℃培养,37℃转座诱变,50℃进行pMarA质粒消除,最后通过抗性筛选,获得3 500个转座子插入突变的单克隆,构建...
本研究利用携带mariner-Himar转座酶和含有卡那霉素抗性转座元件TnYLB-1的pMarA质粒,以杀线虫芽抱杆菌B.nematocida B16g为出发菌株,构建了B16g的插入突变体文库,该库共含5103个转化子.随机挑选30个突变子经卡那霉素抗性和PCR分析检测,结果显示突变体均有卡那霉素抗性和卡那霉素抗性基因,表明文库是可靠的.关键词:杀...
该转座子TnYLB‐1的转座效率达到2.4×10-3,pMarA的质粒消除率达97.3%。随机挑选12株突变子进行PCR及Southern blotting杂交,结果表明:转座子TnYLB‐1能够随机插入到B9407基因组上,大于90%的突变子为转座子单拷贝插入。B9407 T nY L B‐1转座子突变体库的构建为筛选和研究影响该菌株生防功能相关的基因并揭示...