用转入TNF_α基因并稳定表达了 4年多的丝状体蓝藻———鱼腥藻 712 0 (Anabaenasp .PCC 712 0 ) ,研究比较了在培养液中氮源 (NaNO3 )和碳源 (NaAc)对转基因藻生长和TNF_α基因的不同影响.氮源能稳定外源蛋白的表达 ,而碳源则影响细胞壁的合成.通过比较几种不同的破碎细胞的方法 ,发现超声破碎得到的可溶...
毒副作用强而难以在临床上 应用.本课题根据肿瘤组织一般高分泌基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的特点,从已构建的四种MMPs介导的肿瘤靶向性rhTNF-α融合蛋白表达质粒进行表达纯化得到目的 融合蛋白,用得到目的融合蛋白作用于体外培养的肿瘤细胞,并检测各融合蛋白的TNF-α样活性,封闭效果及杀伤肿瘤细胞的...
应用基因工程手段制备高效低毒的hTNF-α突变体和具肿瘤靶向性的TNF-α融合蛋白呈现出较好的应用前 景.本课题根据肿瘤组织一般高分泌MMPs特点,构建MMPs介导的肿瘤靶向性rhTNF-α融合蛋白表达质粒,使融合蛋白特异性地靶向于肿瘤组织,肿瘤 组织高浓度的MMPs水解其底物序列,暴露出hTNF-α受体结合部位.hTNF-α与其受体...
采用热处理、盐析和离子交换层析技术对新型人肿瘤坏死因子α衍生物(命名为hTNFD)蛋白进行了纯化,纯化后的纯度大于96%,回收率为43.8%,纯化倍数为6.4倍。经L929细胞测活结果表明,hTNFD的比活可达1.01×10^10U/mg,比原型TNFα活性提高465倍,整个纯化工艺简单、稳定,易于放大,显示出较好的临床应用前景。关键...