原始Tn5酶是由两个1.5 kb的IS50插入序列夹带的抗生素耐药区组成，IS50L和IS50R。它是通过多步骤酶切-粘贴机制行使功能。具体为：两分子tn5转座酶单体首先结合到IS50元件末端的两个19 bp区域（OE序列和IE序列），然后通过二聚体形成突触复合体；转座酶促进重组的三个核心步骤这些蛋白可以识别移动元件末端的特定DNA...
TN5 转座酶可以用于基因克隆和测序等技术。帮助科学家获取特定的基因片段。它在微生物研究中有着广泛的应用。能够揭示微生物基因的功能和调控机制。转座酶还可以用于构建突变体库。 为基因功能的研究提供丰富的材料。TN5 转座酶介导的转座事件可以引发基因表达的改变。进而影响生物的表型。对转座酶的研究有助于理解生物...
tn5酶的制备工艺一般包括以下几个步骤: 1. 制备tn5酶表达载体:将tn5酶基因克隆到适当的表达载体中,一般选择具有高表达能力的原核或真核表达系统。 2. 转化宿主细胞:将tn5酶表达载体转化至宿主细胞中,如大肠杆菌等。经过适当的筛选和鉴定,获取含有tn5酶表达载体的宿主菌株。 3. 培养宿主菌株:将含有tn5酶表达载体的...
在 ISSAAC-seq中，首先使用带有通用Nextera接头的Tn5转座酶（R1，R2）插入标记染色质开放区域，这种带有通用Nextera接头的Tn5转座酶常用于典型的scATAC-seq实验；随后添加一段引物（这段引物包含部分的Truseq接头R2序列、10 bp的UMI分子标签，以及poly-T序列）用于核内的逆转录反应；随后，使用一侧包载有Nextera接头R1...
Tn5转座酶建库原理.pptx,Tn5转座酶建库原理作者: Tn5转座酶简介Tn5是一种转座酶,能够将DNA片段插入到目标基因组中。Tn5转座酶广泛应用于二代测序文库构建中。Tn5转座酶是近年来基因组研究的重要工具。 Tn5转座酶的结构特点DNA 结合域Tn5 转座酶包含一个高度保守的 DNA 结
Tn5转座酶复合体因能一步打断双链DNA并且使DNA两端带上接头,而广泛应用于二代测序建库等领域。近期也有研究发现,Tn5转座酶同样能以类似的方式作用于RNA/DNA杂合链,从而能够省去传统RNA建库技术中的RNA片段化、二链合成等繁琐的操作步骤,进一步拓展了Tn5转座酶的新用途。此外,Tn5转座酶也被广泛用于体外转基因(外源基...
tn5转座酶在基因组测序中的应用。基因组测序是联合多组学研究的基础,可以揭示生物体的基因组结构和序列信息。tn5转座酶可用于将DNA片段随机插入到待测序的基因组中,从而构建测序文库。与传统文库构建方法相比,tn5转座酶具有高效、快速和无需特定引物的特点,大大简化了实验操作流程。此外,tn5转座酶还可用于建立谱系追踪模...
Tn5转座酶建库原理Tn5转座酶是一种强大的工具,用于构建用于下一代测序(NGS)的DNA文库。它通过在基因组DNA中插入接头序列来实现这一目标。hdbyhd Tn5转座酶的结构和功能结构Tn5转座酶是一个由两个亚基组成的蛋白质,每个亚基都包含一个DNA结合域和一个催化域。功能Tn5转座酶能够识别并切割特定的DNA序列,并将一个DNA...
1. TN5转座酶的发现与特点。 TN5转座酶最早是在大肠杆菌(Escherichia coli)的质粒R65中发现的。它是一种DNA转座元件,能够识别并切割DNA链,将自身或其他DNA片段转移到宿主DNA中。与其他转座酶相比,TN5转座酶有着独特的特点。 1.1随机识别DNA序列。 TN5转座酶不依赖于特定的识别序列,而是能够在DNA链上的任意位置进行...
pA-Tn5转座酶的创新之处在于将Protein A的特异性结合能力与Tn5转座酶的高效DNA操作能力相结合,形成了一种新的分子工具。 2、高效转座 pA-Tn5转座酶在体外的转座效率极高,是野生型Tn5转座酶的1000倍,这使得它在处理微量样本时更为有效。 三、pA-Tn5转座酶的应用领域 ...