TMT标记 串联质量标签TMT（Tandem Mass Tag）是美国Thermo Fisher公司研发的一种体外标记蛋白定量技术。其基本原理是将水解后得到蛋白质多肽氨基酸N端和赖氨酸残基利用TMT试剂标签进行标记，然后进行质谱分析，通过串联质谱获得的离子峰强度和离子峰质荷比进行蛋白质的定性和定量分析。TMT实验单次最高可同时对16种不同的...
TMT 定量分析工作流程 TMT 技术免费电子书 资源和支持 定量蛋白质组学综述:LC-MS 多通路检测的巨大优势 了解TMT 标记定量蛋白质组学技术和多通路技术的巨大优势如何帮助科学家持续跟踪细胞中的蛋白质,促进其深入理解细胞的作用机制、分子为何及如何在细胞中移动以及这...
TMT标记步骤：蛋白样本经过胰蛋白酶酶解为小片段肽段，再使用不同的TMT试剂分别标记不同的样本，之后将标记后的样本等量混合后进行质谱分析。在质谱分析中，来自不同样本的同一种肽段带有不同的报告基团，报告基团在二级质谱中碰撞碎裂后产生具有不同分子质量的报告离子。质谱检测中报告离子信号的强弱即可代表肽段在不...
TMT(Tandem Mass Tag)技术是由美国Thermo Scientific公司研发的一种多肽体外标记技术,广泛用于差异表达蛋白质组分析研究中,该技术采用6重、10重或16重同位素标签,通过特异性标记多肽的氨基基团,与肽段的氨基发生共价结合反应,然后进行串联质谱分析,可实现同时对6个/10个/16个不同样...
iTRAQ/TMT标记定量蛋白质组研究是对一个基因组表达的全部蛋白质或一个复杂混合体系内所有蛋白质进行标记,利用标记试剂中的二级报告离子来对蛋白进行精确鉴定和定量。 标记试剂分为两种:iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags),是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外...
iTRAQ和TMT均是化学标记方法,能够实现肽段的同位素编码,进而实现肽段和蛋白质的定量。 一、iTRAQ标记 iTRAQ(Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)是一种同位素标记定量技术,可以同时比较2-8个样品的蛋白质表达差异。iTRAQ试剂是由一个平衡的化学标签组成,包括一个活化酯(用来与肽段结合)、一个荷质...
TMT是由美国Thermo Fisher 公司研发的一种多肽体外标记技术,最多可进行18例样本的蛋白质同批定量分析。TMT试剂由肽结合基团、平衡基团和报告基团三部分组成,可形成18 种等量异位标签。具体实验流程及原理如下图:以5例样品的TMT标记定量检测为例。在实验过程中将5例不同样品分别酶解成多肽片段→分别标记5种同位素标签...
TMT标记的定量磷酸化蛋白组学即利用TMT标记定量技术对磷酸化蛋白进行定量分析,其定量方法与进行普通蛋白的原理都相同，只是由于在正常生理状态下磷酸化修饰的水平较低，因此通常需要对酶切后的磷酸化肽段进行富集，如抗体富集、IMAC富集以及TiO2富集等，以提高磷酸化修饰肽段的丰度，保证质谱检测结果的灵敏度和准确性。
TMT蛋白质组学实验技术原理 TMT(Tandem Mass Tags)是由美国Thermo公司研发的体外同重同位素标记的定量技术。该技术采用10-plex或16-plex标记试剂,可以同时比较10组或16组样本之间的蛋白表达差异。TMT同位素试剂标记多肽氨基基团后,等量混匀多肽并进行LC-MS/MS分析。一级质谱中,不同样品来源的同一肽段表现出相同的m/...
TMT标记定量技术 简介 技术优势 实验流程 应用领域 仪器平台 样品要求 Thermo ScientificTM公司的TMT (Tandem Mass Tag)标记定量技术和AB SCIEXTM公司的iTRAQ技术都属于二级报告离子定量技术,具有相似的原理(图1):提取样品中的总蛋白并酶解为多肽,多肽N-term以及末端Lysine侧链基团的游离氨基能够与TMT标签进行共价结合,...