对于长度在20个碱基左右的引物,其Tm值的估算通常遵循一个简单的公式:2x(A+T) + 4x(G+C),这个估算值能够提供一个基本的指导。理想情况下,引物的Tm值一般设在60℃左右,以保证四种碱基ATGC在引物中的均匀分布,避免过多的A-T或G-C碱基堆积。此外,5'端的碱基推荐使用G或C,以增加稳定性。对...
对于Taqman探针来说,探针的TM值要高于引物的TM值5℃以上。因为从95℃变性到60℃退火过程中,探针是先...
引起DNA发生“熔解”的温度范围比较窄,只有几度。通常以增色效应达到最大值的一半时的温度叫DNA的熔解温度(或熔点),以符号Tm表示。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系。——百度百科 利用引物设计软件预测F/R引物的Tm值 退火温度:Tm值减3-5度即可 primer premier 5.png SnapGene...