对于长度在20mer或25mer以下的短引物,可以使用以下公式来计算Tm值: Tm = 4(G+C) + 2(A+T) - 5 其中,G、C、A、T分别代表引物序列中鸟嘌呤(Guanine)、胞嘧啶(Cytosine)、腺嘌呤(Adenine)和胸腺嘧啶(Thymine)的数量。需要注意的是,有些资料在公式中不包含“-5”,但“-5”这个校正值是为了更好地适配PC...
计算TM值的经典公式为：TM = 4(G + C) + 2(A + T)其中，G、C、A和T分别代表序列中的鸟嘌呤（Guanine）、胞嘧啶（Cytosine）、腺嘌呤（Adenine）和胸腺嘧啶（Thymine）的数量。TM值的单位通常是摄氏度。这个公式基于DNA和RNA的碱基对结构的特点。由于G和C之间的氢键数量较多，G-C碱基对的熔点温度较高；...
PCR中Tm值如何计算?相关知识点: 试题来源: 解析 引物设计软件都可以给出Tm,引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度有关. 长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T) 对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为: Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/...
引物的Tm值（解链温度）是指在双链DNA分子解链过程中，有一半的DNA分子处于双链状态，另一半处于单链状态时的温度。以下是一些常见的引物Tm值计算公式：Wallace规则。公式：Tm = 2(A + T)+ 4(G + C)。说明：该公式适用于较短（<14bp）的引物。其中A、T、G、C分别是引物中腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和...
相关知识点: 试题来源: 解析 退火温度:PCR反应中引物与模板结合的温度,通常有引物的解链温度TM减去1-2°C; 解链温度(TM):使正确的碱基配对杂交结构相互分开的温度,TM值通常可以由公式计算所得: Tm=〔4×(G+C)+2×(A+T)〕°C 反馈 收藏
引物Tm值计算工具 点击查看使用说明 * 请输入引物序列(方向5'至3',非ATCG字符将会被自动过滤) 0
Tm值 推荐范围:68-70℃。严格PCR条件(如“touchdown PCR”和“两步法PCR”)有助于提高特异性。 序列特异性 引物应与目标基因高度匹配。BLAST搜索可用于检测同源性区域,避免引物间形成二聚体,降低扩增效率。⚠️ 引物设计的禁忌 重复碱基:二核苷酸重复次数不应超过4次(例如ATATATAT)。
长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/size公式中,Size = 引物长度.用Primer5.0,DNA MAN,DNA STAR都可以算,我从来没自己算过. ...
Tm值就是DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构在热变性过程中紫外吸收值达到最大值的1/2时的温度。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系。 核酸Tm值(解链温度)计算 评价标准是核酸所吸收的光线量达到其所增加吸收260nm光线的量的两倍达到的温度, ...