2.4 转染THP-1细胞系将获得的重组慢病毒转染THP-1细胞系，采用威尼德电穿孔仪进行电穿孔转染，以提高转染效率。转染后48小时，荧光显微镜观察并计算转染效率。通过嘌呤霉素筛选，建立FNDC5过表达的稳定转染细胞系。2.5 检测FNDC5表达情况将稳定转染的THP-1细胞系分为三组：空白组、空载组和FNDC5组。采用Western bl...
中国病原生物学杂志JournalofPathogenBiology014年10月October014,Vo1.9,No.10第9卷第10期·865·DOI:10.13350/j.cjpb.141001天然免疫分子LILRB5慢病毒稳定转染THP一1细胞系的构建*,张之勇,任霞,宋冠华,禹林昌,史美艳,袁晓芬。,郭强,李莲莲,张晓瑜,姜国
方法将LILRB5构建入真核表达载体pEGFP-flag,瞬时转染293T细胞系,通过免疫荧光和流式细胞术检测LILRB5-GFP和LILRB5-flag在293T细胞中的表达。构建慢病毒表达载体pHR-LILRB5,与p8.91和pMD共同转入293T细胞,产生标记有绿色荧光的LILRB5慢病毒,感染单核细胞系THP-1后通过流式细胞术检测LILRB5的表达。结果测序显示真核...
目的:通过构建慢病毒介导的CD86过表达THP-1细胞,探究CD86过表达THP-1巨噬细胞在马尔尼菲篮状菌(Talaromycesmarneffei,TM)感染中作用. 方法:1.构建慢病毒介导的CD86过表达THP-1细胞:设计目的基因CD86序列引物,PCR扩增制备目的基因片段与线性化载体进行重组反应,获得高纯度慢病毒LV-CD86载体质粒后转染HEK293T细胞进行病毒...
通过油红O染色后观察FNDC5过表达对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞脂质蓄积的影响.结果 :PCR产物鉴定及测序结果显示成功构建FNDC5过表达慢病毒载体;转染293T细胞后可检测到绿色荧光,Western blot检测FNDC5-Flag标签有表达,包装后病毒的滴度...
1、本发明的目的是提供一种慢病毒转染技术构建cd226分子高表达的thp-1细胞系的方法。cd226分子已经被证明在巨噬细胞功能调控中发挥重要作用,为了更好地观测cd226分子在人单核/巨噬细胞发挥功能中的作用,本发明采用慢病毒转染技术构建了稳定高水平表达cd226分子的thp-1细胞系,该细胞系可实现cd226分子在该细胞中的高水...
构建慢病毒表达载体pHR-LILRB5,与p8.91和pMD共同转入293T细胞,产生标记有绿色荧光的LILRB5慢病毒,感染单核细胞系THP-1后通过流式细胞术检测LILRB5的表达。结果测序显示真核表达载体pEGFP-LILRB5-flag的序列与预期相符,瞬时转染pEGFP-LILRB5-flag的293T细胞可检测到绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术检测显示LILRB5-fla...
构建慢病毒表达载体 pHR_LILRB5,与p8-91和pMD共同转入 293T 细胞,产生标记有绿色荧光的 LILRB5慢病毒,感染单核细胞系 THP_1后通过流式细胞术检测 LILRB5 的表达. 结果 测序显示真核表达载体 pEGFP_LILRB5一flag 的序列与预期相符,膘时转染 pEGFP_LILRB5_Hag的293T细胞可检测到绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术...