THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法:1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心;Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若细胞碎...
答:1.THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况,THP-1细胞被发现自发贴壁[3],可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞;2.当贴壁细胞比例高于20%,建议排查细胞生长培养箱温度及CO2浓度、培养基成分(营养体系的酸碱性)、以及培养瓶可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁;3.更换血清可能会导致THP-1细胞...
首先,了解一下THP-1的基本信息。图1 THP-1细胞生长正常图片 细胞复苏:1) 准备工作:将完全培养液置37℃水浴锅预热30分钟。2)在超净台内吸取7 mL完全培养液至15 mL离心管中 3)将细胞从干冰里取出,用镊子夹住盖子放入37℃水浴中快速晃动(注意:水不能没过盖子),使其在1分钟左右完全融化;4)将细胞悬液...
如果THP-1细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 方法一: 收集THP-1细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液补加1-2ml培养液后吹匀,将THP-1细胞悬液按1:2的比例分到新的含10ml培养基的新皿中或者瓶中。 方法二: 可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起将THP-1细胞悬液按1:2到1:...
THP-1生长图片 培养攻略之收货篇 1. 常温细胞:收到细胞后,放进培养箱静置2-4小时,之后将瓶中培养基全部离心(1200rpm或250g,3分钟),去上清,用适量新鲜培养基重悬细胞,按比例接种到新培养瓶中。2. 冻存细胞:收到细胞后,如果不复苏,放进-80℃冰箱暂存或放进液氮长期保存。如果复苏,按照常规复苏步骤...
THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性,一般超过10^6/ml传代,比例一般为1:3/1:4,因此目前利用的两种传代方式: (1)半换液传代(不用离心):吸取培养瓶或者培养皿中的细胞移至新的培养瓶或者培养皿中,补足培养基2-3ml。 (2)传统的离心传代:将瓶子或皿中的细胞吸取至15mL离心管中,700-800rpm,离心5min;弃...
先做一个简短介绍:THP-1 细胞系最初来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,属于悬浮细胞,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。 表1 THP-1(人单核细胞白血病细胞)细胞基本信息 图1 1640基础培养基(abs9484)和胎牛血清(特级)(abs972) ...
THP-1细胞系是1980年建立的人单核细胞白血病细胞系,从一位患有急性单核细胞白血病的小男孩外周血中分离得到,有分化多种巨噬细胞的能力,被广泛应用于单核细胞和巨噬细胞的相关机制、免疫和炎症信号通路等研究。NOTES 细胞培养注意事项 1、该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量,冻存时活细胞密度不能...
THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静置片刻后使得细胞...
· THP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长,对培养基变化非常敏感,所以 尽量使用相同Ph的1640。 · 传代后切忌常移出培养箱观察,否则会影响细胞生长,状态变差,一般首先表现为细胞内颗粒变多。一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3~4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1...