（5）诱导成功的标志：单核细胞THP-1用PMA诱导后，由悬浮式生长变成贴壁生长，由圆形变成不规则形态，体积进一步增大，细胞浆疏松，细胞核增大明显，可见大量明显细胞器，胞膜周围可见少量突起。PMA诱导THP-1细胞培养的相差显微照片 用PMA孵育THP-1细胞48h，显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它...
THP-1细胞通常用佛波酯(PMA)(abs9107)诱导分化为巨噬细胞,然后在PMA仍然存在的情况下: 加入脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓度:20ng/mL)(abs04123)培养48h,诱导其向M1极化; 加入IL-4(诱导浓度:20ng/mL)(abs04698)、IL-13(诱导浓度:20ng/mL)(abs04079)培养48h,诱导其向...
单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起[3]。 图2. THP-1经PMA诱导分化为巨噬细胞 THP-1分化为泡沫细胞 THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞后,可以通过摄取大量脂质转变为泡沫细胞,这也是动脉粥样...
加入PMA,显微镜下细胞计数,调整THP-1细胞密度为5*10^5/mL; 使PMA终浓度为100ng/mL,将细胞种入六孔板,每孔加入细胞2mL; 48h后,显微镜下观察巨噬细胞构建成功。 单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周...
THP-1诱导完成后可通过流式和免疫荧光、ELISA或特异性标记物(如IL1、IL10、精氨酸酶)的基因表达分析来评估向M1和M2型巨噬细胞的正确分化,并且从形态上也可以看出来,都是最基础的鉴定方法,这就不一一述来了。 PMA刺激后的THP-1 THP-1细胞的诱导的M1形态(PMA) ...
(3)接种细胞:收集THP-1细胞并进行计数,用诱导培养基重悬细胞沉淀调整细胞密度为5*10^5/mL,将细胞种入六孔板,每孔加入细胞悬液2mL; (4)诱导培养:48h后,显微镜下观察巨噬细胞构建成功; (5)诱导成功的标志:单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松...
差异表达基因的GO分析表明,PMA诱导后上调表达的基因主要涉及细胞通讯、信号转导、细胞对外部刺激的反应、信号受体结合、细胞因子活性、膜组成变化,而PMA诱导后下调表达的基因主要涉及细胞周期过程、细胞增殖、DNA结合和复制、细胞分裂和核分裂。这一结果表明,在PMA诱导后,THP-1细胞对刺激应激更敏感,对细胞内信号传导更活...
单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。 图2. THP-1经PMA诱导分化为巨噬细胞 THP-1分化为泡沫细胞 THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞后,可以通过摄取大量脂质转变为泡沫细胞,这也是动脉粥样硬化...
在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这个过程中,细胞会发生形态变化和生长方式的改变,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。 分化后的巨噬细胞可以被进一步诱导分化为M1型或M2型巨...
THP-1 可以被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,并通过脂多糖(LPS)和 IFN-γ 诱导 M1 极化、通过 IL-4 & IL-13 和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导 M2 极化,并释放相应的细胞因子。在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的作用下,巨噬细胞可进一步形成泡沫细胞,这是动脉粥样硬化斑块内出现的特征性病理细胞,是一...