1.实验目的:THP-1慢病毒感染(CRISPR-Cas9体系,两步法)。第一步,LentiCas9慢病毒感染,让WT THP-1表达Cas9蛋白,通过Blasticidin(BSD)加压筛选;第二步,LentiGuide慢病毒感染,让THP-1(表达Cas9)表达sgRNA,通过Puromycin(Puro)加压筛选,从而得到目的基因敲除的THP-1 KO细胞株。 2.实验结果:得到表达Cas9的THP-1工具株...
2.基因编辑方法 由于CRISPR/Cas9易于构建、效率较高和在人细胞中的毒性较低,在基因编辑应用中备受青睐。 可采用化学修饰合成的sgRNA,降低RIG-I及一型干扰素通路的激活,从而最大程度上提高细胞存活率,保证被编辑细胞的表型不因一型干扰素通路的激活而受到影响。 通过简单的电转化的方式将RNP递送到细胞内,3天即可完成...
THP-1是从急性单核细胞白血病患者的外周血中分离出的单核细胞。在某些诱导分化剂作用下，THP-1细胞可以被诱导分化为多种巨噬细胞，是研究炎症、免疫反应等领域的理想模型。此外，还可使用CRISPR Cas9技术编辑的THP-1细胞进行巨噬细胞作用机制、免疫应答通路研究、炎症疾病治疗开发等研究。值得注意的是，THP-1是悬浮...
案例一、基于CRISPR/Cas9技术构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株的研究 该研究旨在采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1（IDO1）基因敲除的THP-1细胞株，为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。 研究者设计了靶向IDO1基因的3条向导RNA（gRNA），构建了IDO1-gRNA重组质粒，并通过酶切及测序鉴定后包装...
源井生物依靠独家CRISPR-U™技术体系,拥有超5000例成功案例,其中THP-1基因编辑是源井生物的明星服务,尽管THP-1具有转染难、单克隆生长率低等特点,源井生物研发了一系列优化措施,大幅提升了THP-1的基因编辑成功率,可复制链接详情>>https://www.ubigene.com/service/cell/3107.html ...
THP-1是从急性单核细胞白血病患者的外周血中分离出的单核细胞。在某些诱导分化剂作用下,THP-1细胞可以被诱导分化为多种巨噬细胞,是研究炎症、免疫反应等领域的理想模型。此外,还可使用CRISPR Cas9技术编辑的THP-1细胞进行巨噬细胞作用机制、免疫应答通路研究、炎症疾病治疗开发等研究。
案例一、基于CRISPR/Cas9技术构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株的研究 该研究旨在采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。 研究者设计了靶向IDO1基因的3条向导RNA(gRNA),构建了IDO1-gRNA重组质粒,并通过酶切及测序鉴定后包装成Lenti...
基于THP-1细胞的众多优点,不少科研人员以THP-1细胞为遗传背景进行基因修饰,再分化巨噬细胞,开展免疫和炎症等领域的研究。比如下面的报道[2],作者通过CRISPR-Cas9系统在THP-1细胞中敲除CXCR4,再分化为肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs),从而研究在TAMs中敲除CXCR4对乳腺癌细胞迁移的影响。
应用: 在研究中,THP-1细胞可用于3D细胞培养、免疫系统紊乱、免疫学和毒理学研究。 是合适的转染宿主。 可使用CRISPR Cas9技术编辑的THP-1细胞进行巨噬细胞作用机制、免疫应答通路研究、炎症疾病治疗开发等研究。 这些特性使得THP-1细胞在研究中有着广泛的应用。
近年来,随着高通量测序技术和生物信息学的飞速发展,THP-1细胞系的研究也取得了一系列创新成果。例如,通过整合多组学数据,科研人员能够更全面地解析THP-1细胞的生物学特性,发现新的治疗靶点。此外,利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术,可以精确地敲除或过表达特定基因,从而深入探究其在白血病发生发展中的作用。