细胞传代：离心法：1）将所有细胞悬液转移至离心管中，1100rpm离心4min 2）离心结束弃上清，用适量完全培养基轻柔混匀细胞，吸取20 ul细胞悬液进行细胞计数 3）根据计数结果确定传代比例，将细胞密度调整为2×105~4×105个细胞/mL，视细胞培养体积将细胞培养在不同规格的培养瓶中。4）置于37℃、5%CO2培养箱内...
一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3～4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,一般2-3次换液离心一次(只是补充培养基)3) 使用1640(ATCC推荐),注意加碳酸氢钠2...
Tips：用直接分瓶法传代1-2次后需进行离心传代。THP-1 细 胞 冻 存 方 法 1. 取少量细胞悬液进行计数确认细胞密度。Tips：若冻存前培养基已经变黄，先换液静置培养4h左右，待细胞活力稳定后再进行冻存。2. 准备所需的培养基、PBS、血清、DMSO、离心管以及无菌枪头等；（试剂需提前预热）3. 根据收集...
培养攻略之传代篇 1. 直接分瓶法：摇晃培养瓶，把细胞摇匀，均分到两个瓶子里，每瓶再补充等量培养基；2. 离心法：离心后计数，按照40-50万细胞/mL的密度接种到T25瓶里，瓶中培养基量以5mL为宜。不方便计数时，按1:2比例传代。小贴士：细胞碎片较多的情况下，建议用离心法传代，离心转速可适当降低（推荐800...
传代比例通常为1:21:4，传代频次为23天传代一次。冻存 预先配制好冻存液（通常含有DMSO和FBS）。将细胞离心后去上清，用冻存液重悬细胞。将细胞悬液转移至冻存管中，放入程序冻存盒，然后放入-80℃冰箱过夜，再放液氮长期保存。冻存密度建议为200万~300万/mL，以提高复苏存活率。4.注意事项 THP-1细胞对血清...
➌ THP-1细胞有密度依赖性,THP-1细胞密度低时,生长较慢,培养密度维持在4 ~8×105 /mL为宜;超过2.0 ×106 /mL则需要传代。➍ THP-1细胞对机械力较敏感。正常培养时,应尽量避免吹打力道过大。暴力吹打会使细胞分化和死细胞增加。➎ 血清质量差异可能引起细胞状态变化,建议选用高质量的胎牛血清。 THP-1...
Tips：THP-1培养时，培养基一定要给充足Q细胞贴壁了怎么办？ATHP-1培养时有少量贴壁是正常现象，建议在传代时只吸取上清换瓶培养。或者可以使用不贴壁的无菌培养瓶培养。Q细胞聚团了怎么办？A少量聚团属于正常现象，但较多聚团需要注意，检查培养箱是否正常、培养体系酸碱性以及血清是否合适，适当更换血清。
推荐传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次 培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳,温度:37℃ 传代操作 当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。去掉培养皿中的培养基,加入PBS进行冲洗,并去上清;加入胰酶进行润...
一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3～4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,一般2-3次换液离心一次(只是补充培养基)3) 使用1640(ATCC推荐),注意加碳酸氢钠...
（1）RAW264.7细胞对胰酶不敏感，细胞传代时推荐使用细胞刮刀。（2）RAW264.7细胞通常会连片生长，散布在培养瓶/皿中。传代时，保证中等密度接种，调整细胞传代比例，避免因细胞过稀导致生长缓慢等情况的发生。（3）培养时注意观察细胞形态，当发生细胞由圆形或椭圆形变为四角形，或伸出伪足等情况时，说明细胞状态...