THP-1 细 胞 传 代 方 法 离心法：1. 取少量细胞悬液进行计数确定细胞密度，密度80万/mL以上传代，并根据计数结果确定传代比例；2. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等；（培养基提前预热）3. 用移液器吸取培养瓶内细胞悬液转移至离心管中；4. 900-1000rpm，3min离心收集细胞；5. 在培养瓶...
气相条件：THP-1细胞需要在含有95%空气和5%二氧化碳（CO2）的混合气体环境中培养，以模拟细胞在体内的生长环境。温度与湿度：培养箱的温度应维持在37摄氏度，湿度通常保持在70%-80%，以确保细胞在最佳条件下生长。三、细胞传代与换液 传代方法：当THP-1细胞的密度达到80万/mL以上时，通常需要进行传代。传代时，可...
传代比例 首次传代建议1:2传代 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶 传代方法 方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿...
一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3～4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,一般2-3次换液离心一次(只是补充培养基)3) 使用1640(ATCC推荐),注意加碳酸氢钠2...
4.细胞传代:当细胞达到 80%-90%汇合时,使用0.25%胰蛋白酶和0.02% EDTA溶液进行消化,并按照1:3-1:5的比例传代。 5.细胞冻存:当细胞达到80%-90%汇合时,使用细胞冻存液进行冻存,并置于-80℃冰箱中保存。 二、注意事项: 1.无菌操作:确保所有操作过程在无菌条件下进行,以防止污染。 2.细胞密度:注意控制细胞...
传代比例通常为1:21:4，传代频次为23天传代一次。冻存 预先配制好冻存液（通常含有DMSO和FBS）。将细胞离心后去上清，用冻存液重悬细胞。将细胞悬液转移至冻存管中，放入程序冻存盒，然后放入-80℃冰箱过夜，再放液氮长期保存。冻存密度建议为200万~300万/mL，以提高复苏存活率。4.注意事项 THP-1细胞对血清...
推荐传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次。 培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃ 01. 培养攻略 - 复苏操作 /以T25培养瓶为例 / 预热水浴锅至37℃; 将细胞从液氮中取出后,放进一次性PE手套中,立即投入水浴锅,迅速用力摇晃管子,使其在1分钟内融化; ...
· THP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长,对培养基变化非常敏感,所以 尽量使用相同Ph的1640。 · 传代后切忌常移出培养箱观察,否则会影响细胞生长,状态变差,一般首先表现为细胞内颗粒变多。一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3～4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1...
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。 b、细胞冻存: 1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次; 2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回...
THP-1细胞传代步骤 如果THP-1细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 方法一 收集THP-1细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液 补加1-2ml培养液后吹匀,将THP-1细胞悬液按1:2的比例分到新的含10ml培养基的新皿中或者瓶中。 方法二 可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起 ...