🔬 诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞 取一支10μl PMA母液(含10μg PMA),加入990μl无FBS的1640培养基,配制成1ml的10μg/ml PMA工作液,即10ng/μl。 对于5ml培养瓶,添加50μl PMA工作液;六孔板每孔添加20μl。📊 实验步骤 细胞计数:对THP-1细胞进行计数,离心重悬后控制细胞密度为4×10^5/ml。 加入...
thp-1诱导实验原理thp-1诱导实验原理 THP-1细胞诱导实验原理如下: THP-1细胞是单核细胞系,通常用于模拟研究人体单核细胞/巨噬细胞的生物学特性和功能。这些细胞可以被诱导分化为不同类型的巨噬细胞,如M1型和M2型巨噬细胞。 在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这个过程中,...
用PMA孵育THP-1细胞48h，显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变...
加入终浓度为100ng/ml的PMA，24孔培养板中加入1ml细胞悬液，诱导分化24h，替换成新鲜RPMI 1640完全培养...
THP - 1 细胞作为人单核细胞白血病细胞系,在科研领域常被用于诱导分化为巨噬细胞,以模拟体内巨噬细胞功能与特性,而佛波酯(PMA)是诱导这一过程的关键试剂。以下详述操作要点。 前期准备至关重要。先确保细胞培养环境稳定适宜,在含 10% 胎牛血清、1% 青 - 链霉素的 RPMI 1640 培养基里,将 THP - 1 细胞置于 ...
通过PMA诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞(Mφ),是在体外研究人Mφ的常用模型。然而,这一模型仍缺乏统一的诱导方法。近期,来自中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所梁米芳和王世文领衔的研究团队,在综合性期刊《PLoS One》发表了一项研究,他们从培养时间、细胞密度、PMA浓度这三方面优化了THP-1细胞分化为Mφ的诱导条件,...
THP-1 1.THP-1细胞的诱导分化 (1)THP-1用185ng/ml佛波酯(PMA,用DMSO溶解)作用6小时,诱导细胞分化为巨噬细胞(M0)。 (2)在PMA继续存在的情况下,通过分别: •与IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1表型极化。 •与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,...
今天我想和大家分享一下如何用THP-1细胞通过PMA诱导M0巨噬细胞。这个过程其实挺有意思的,但也需要一些小技巧。下面我就详细说说我的实验步骤,希望能帮到大家。 铺板🧪 首先,我们需要在6孔板里铺细胞。具体来说,每孔加入200万细胞(贴壁后细胞密度大概80%-90%),然后加入80ng/mL的PMA(这个PMA是MCE的HY-18739,...
在科学研究中,THP-1细胞常被诱导分化为M1和M2型巨噬细胞和泡沫细胞,用于炎症的研究。在具体的诱导分化实验中,THP-1首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,随后进行下一步实验: 1.诱导为M1型巨噬细胞:通过脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导巨噬细胞进一步发生M1型极化,释放出TNF-α、IL-6等细胞因子,这是经典的炎症模...
在诱导过程中，需要密切观察细胞的变化。在加入 PMA 后不久，你会发现 THP-1 细胞开始发生形态变化。原本悬浮生长的 THP-1 细胞逐渐贴壁，细胞形态由圆形变为不规则形状，这是向巨噬细胞分化的重要标志。诱导时间一般为 24 - 48 小时，具体时间可根据实验需求和细胞状态进行调整。诱导完成后，对分化后的巨噬细胞...