首先，准备工作至关重要。确保实验所用的 THP-1 细胞处于良好的生长状态，细胞活性高且无污染。准备适量的 PMA 储备液，一般将 PMA 溶解在 DMSO（二甲基亚砜）中配制成高浓度储备液，以便后续使用。接着进行诱导过程。将 THP-1 细胞接种在合适的培养容器中，如培养瓶或培养板。根据细胞密度和实验需求，加入适量的...
用PMA孵育THP-1细胞48h，显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变...
THP-1细胞是从急性单核细胞白血病患者外周血中分离出来的单核细胞,广泛应用于单核细胞和巨噬细胞相关机制、信号通路等研究;形态和分化特性类似于原代单核细胞和巨噬细胞,在体外,常用PMA(phorbol 12-肉豆酸酯13-乙酸酯)或1α,25(OH)2D3 (1α,25-二羟基维生素D3或vD3)诱导分化THP-1细胞为巨噬细胞。因此,THP-...
加入终浓度为100ng/ml的PMA，24孔培养板中加入1ml细胞悬液，诱导分化24h，替换成新鲜RPMI 1640完全培养...
THP - 1 细胞作为人单核细胞白血病细胞系,在科研领域常被用于诱导分化为巨噬细胞,以模拟体内巨噬细胞功能与特性,而佛波酯(PMA)是诱导这一过程的关键试剂。以下详述操作要点。 前期准备至关重要。先确保细胞培养环境稳定适宜,在含 10% 胎牛血清、1% 青 - 链霉素的 RPMI 1640 培养基里,将 THP - 1 细胞置于 ...
在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这个过程中,细胞会发生形态变化和生长方式的改变,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。 分化后的巨噬细胞可以被进一步诱导分化为M1型或M2型巨...
首先,我们需要在6孔板里铺细胞。具体来说,每孔加入200万细胞(贴壁后细胞密度大概80%-90%),然后加入80ng/mL的PMA(这个PMA是MCE的HY-18739,用DMSO溶解)。最后,每孔再加2mL完全培养基,然后诱导24小时。 镜下观察 🔬 24小时后,你可以在显微镜下看看细胞状态。你会发现细胞几乎全都贴壁了,有些还成了梭形,胞...
在科学研究中,THP-1细胞常被诱导分化为M1和M2型巨噬细胞和泡沫细胞,用于炎症的研究。在具体的诱导分化实验中,THP-1首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,随后进行下一步实验: 1.诱导为M1型巨噬细胞:通过脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导巨噬细胞进一步发生M1型极化,释放出TNF-α、IL-6等细胞因子,这是经典的炎症模...
我们将通过流式细胞术检测分化过程中细胞表面标志物的表达变化,如CDCD68等,以及细胞内分子如肿瘤坏死因子TNF-α、白介素IL-1β等的表达情况,从而全面揭示PMA诱导THP-1细胞向巨噬细胞分化的分子机制。 通过本文的研究,我们期望能够为深入理解巨噬细胞分化过程中的分子事件提供新的视角,并为开发针对巨噬细胞相关疾病...
目的:用流式细胞术明确单独使用PMA诱导THP-1细胞分化而来的巨噬细胞的分化情况。 方法:首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达...